MOVAS细胞（小鼠主动脉血管平滑肌细胞）

MOVAS细胞（小鼠主动脉血管平滑肌细胞）是一种纺锤形细胞系，于1999年首次从成年小鼠的主动脉平滑肌中分离。通过胶原酶和弹性蛋白酶的消化处理，分离得到的原代血管平滑肌细胞，然后用编码SV40大T抗原和新霉素抗性基因的逆转录病毒进行转染。转染后的细胞在含有0.4 mg/ml G418的培养基中进行克隆选择，并通过限制稀释法获得亚克隆。MOVAS细胞系广泛应用于心血管疾病研究。

MOVAS细胞特性特征

基因表达：肌动蛋白，α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Calponin 1、德斯敏(Desmin)、平滑肌蛋白22
遗传特征：含有SV40大T抗原基因、携带新霉素抗性基因
α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫荧光染色呈阳性、细胞纯度高于90%
永生化特征：通过SV40大T抗原转化实现永生化

MOVAS细胞参数表

细胞名称	MOVAS细胞（小鼠主动脉血管平滑肌细胞）
细胞别称	MOVAS-1; Movas-1; Movas
来源	主动脉；SV40转化；平滑肌；C57BL/6
细胞形态	上皮细胞样
细胞类型	正常细胞
生长特性	贴壁细胞
收录	ATCC
生物安全等级	2
致瘤性	无
永生化方法	SV40大T抗原转化
细胞鉴定	α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫荧光染色阳性，细胞纯度高于90%
基因表达	肌动蛋白，平滑肌α-肌动蛋白；Calponin 1，Desmin，平滑肌蛋白22
培养基	DMEM + 10% FBS + 1% P/S + 0.2 mg/mL G418
培养环境	37℃；5% CO2；饱和湿度
换液周期	2-3天
培养基体积	T25瓶：10-12 mL；10 cm皿：12-15 mL
传代比例	1:2 - 1:4（视细胞生长速度及密度决定）
冻存液配方	92% FBS + 8% DMSO（新手推荐）；或92%完全培养基 + 8% DMSO（高手推荐）
冻存规格	200-300万细胞/mL，每管1 mL
适用领域	3D细胞培养、心血管疾病研究、基础生物学研究

培养教程

MOVAS小鼠主动脉血管平滑肌细胞培养教程

MOVAS细胞的传代步骤

吸干MOVAS细胞的原培养基。
使用3-4 mL常温PBS轻轻润洗MOVAS细胞，持续10-20秒，然后吸走润洗的PBS。
加入1 mL胰酶，轻轻晃动培养瓶使胰酶均匀覆盖MOVAS细胞层。
将培养瓶放入37℃培养箱中消化，观察MOVAS细胞间隙的变化。
当MOVAS细胞间隙增大但未完全脱落时，加入2-3 mL完全培养基以终止消化。
混匀MOVAS细胞后，以900 RPM离心3-5分钟，弃去上清液。
加入新的完全培养基轻轻重悬MOVAS细胞，均匀分配到新培养瓶中。
补足完全培养基，放回培养箱静置培养MOVAS细胞。

MOVAS细胞培养的注意事项

不同品牌的胰酶消化时间可能有所不同，需根据MOVAS细胞状态严格控制消化时间。
消化传代MOVAS细胞时，吹打细胞要轻柔，避免产生过多气泡。

MOVAS细胞的冻存步骤

冻存规格：每管冻存200-300万MOVAS细胞/mL，体积为1 mL。
消化并离心获得MOVAS细胞沉淀后，加入冻存液轻轻重悬MOVAS细胞。
将MOVAS细胞悬液移入标记好的冻存管。
转入程序冻存盒，放入-80℃冰箱过夜，第二天转入液氮保存MOVAS细胞。

MOVAS细胞的复苏步骤

解冻：将MOVAS细胞冻存管在37℃水浴中迅速解冻。
混合：加入5 mL培养基，轻轻混合均匀MOVAS细胞。
离心：以1000 RPM离心5分钟，弃去上清液。
补加培养基：补加4-6 mL完全培养基。

MOVAS细胞的培养基配方对其影响

培养基配方对MOVAS细胞的增殖速度和基因表达有显著影响。标准配方通常包括DMEM + 10% FBS + 1% P/S + 0.2 mg/mL G418。这个配方中的胎牛血清提供生长因子和营养物质，直接影响MOVAS细胞增殖速度。G418作为选择性抗生素，维持MOVAS细胞的遗传稳定性。调整培养基配方可能影响MOVAS细胞的生长状态和基因表达，特别是对平滑肌α-肌动蛋白、Calponin 1、德斯敏和平滑肌蛋白22等标志性基因的表达水平。因此，在进行基因表达相关研究时，需要保持培养条件的一致性，并考虑培养基配方可能带来的影响。