EL4细胞系是一种T淋巴细胞来源的小鼠淋巴瘤细胞系，在1970年通过在C57BL/6小鼠体内应用9,10-二甲基-1,2-苯并蒽诱导淋巴瘤建立，广泛应用于免疫学和肿瘤学研究。

EL4细胞特性特征

• 抗原表达: H-2b、Thy-1.2

• 对药物的反应:对0.1 mM皮质醇具有抗性；对20 μg/mL PHA敏感。

亚系信息

• EL4.IL-2: 产生高水平白介素-2（IL-2）。

• EL4.IL-2: 对0.1 mM 5-溴-2'-脱氧尿苷（BUdR）具有抗性。

• EL4.BU.1.OUAr.1.1: 对0.1 mM 5-溴-2'-脱氧尿苷和1 mM哇巴因具有抗性。

• 病毒检测: EL4细胞缺乏鼠痘病毒（阴性）。

EL4小鼠淋巴瘤细胞参数表

细胞名称	EL4细胞系（小鼠淋巴瘤细胞系）
别称	EL-4, EL 4, E.L.4
种属来源	小鼠
组织来源	T淋巴细胞；淋巴瘤
细胞形态	淋巴母细胞样
生长特性	悬浮生长
生物安全等级	1
抗原表达	H-2b; Thy-1.2
特殊性质	对0.1 mM氢化可的松具有抗性；对20 μg/mL PHA敏感
亚株特性	EL4.IL-2可产生高水平IL-2；EL4.BU.1.OUAr.1.1对BUdR和哇巴因具有抗性
病毒检测	肢骨发育畸形病毒（鼠痘）阴性
培养基	DMEM (含NaHCO3 1.5g/L) + 10% 马血清 + 1% 双抗
培养条件	温度：37℃；气相：95%空气 + 5%二氧化碳
传代密度	80%-90%细胞密度时进行传代
传代比例	1:2 - 1:4
细胞密度调整	2x10^5 ~ 4.0x10^5 个细胞/mL
冻存液体系	50% DMEM + 40% FBS + 10% DMSO 或 90% 血清 + 10% DMSO
冻存密度	1x10^6 ~ 1x10^7 个活细胞/mL
储存条件	液氮储存
支原体检测	阴性
细胞代数	10代以内
细胞规格	1x10^6 cells/T25或1mL冻存管
运输方式	干冰运输（冻存管）或常温运输（T25瓶）
用途限制	仅供科研使用，禁止用于动物或人类疾病治疗产品

EL4小鼠淋巴瘤细胞培养教程

EL4细胞复苏

• 从液氮中取出冻存的EL4细胞，立即放入37℃水浴中解冻。

• 解冻后，将细胞悬液转移至含4 mL预热培养基的离心管中。

• 以1000 rpm离心3-5分钟，弃上清液。

• 用1-2 mL新鲜培养基重悬EL4细胞。

• 将细胞转移到培养瓶或培养皿中，添加适量培养基。

常规培养

• EL4细胞为悬浮生长细胞，不需要胰酶消化。

• 保持细胞密度在2 x 10^5 ~ 4.0 x 10^5个细胞/mL。

• 每2-3天更换培养基或传代一次。

EL4细胞传代方法

• 当EL4细胞密度达到80%-90%时进行传代。

• 传代比例建议为1:2 - 1:4。

• 收集细胞悬液，1000 rpm离心3-5分钟。

• 弃上清液，用新鲜培养基重悬EL4细胞。

• 将细胞按所需密度分配至新的培养瓶中。

换液步骤

• 收集EL4细胞悬液，1000 rpm离心3-5分钟。

• 弃上清液，用新鲜预热的完全培养基重悬细胞。

• 将EL4细胞转移回培养瓶中。

细胞冻存

• 使用冻存液：50% DMEM + 40% FBS + 10% DMSO。

• 调整EL4细胞密度至1 x 10^6 ~ 1 x 10^7个活细胞/mL。

• 将细胞悬液分装至冻存管中，每管1 mL。

• 使用程序降温盒或-80℃冰箱缓慢降温，24小时后转入液氮中长期保存。

常见问题及解决方案:

• 细胞聚集:

• EL4细胞虽然为悬浮生长，但在培养过程中可能出现细胞聚集。

• 解决方案：轻轻吹打EL4细胞悬液，使用细胞筛网过滤去除大的细胞团，适当调整细胞密度。

  
  

• 细胞沉降:

• EL4细胞在培养中可能会出现部分细胞沉降。

• 解决方案：定期轻摇培养瓶，使用旋转培养系统或摇床保持细胞悬浮状态。

  
  

• 细胞活力下降:

• 长期培养或处理不当可能导致EL4细胞活力下降。

• 解决方案：定期检测细胞活力，避免过度消化或机械损伤，保持细胞的完整性。

  
  

• 细胞异质性增加:

• 长期培养可能导致EL4细胞群体中的异质性增加。

• 解决方案：定期进行单克隆分离，使用流式细胞仪进行细胞分选以保持细胞群体的纯度。

  
  

• 细胞污染:

• 细菌或真菌污染可能影响EL4细胞的生长状态。

• 解决方案：严格遵守无菌操作规程，定期检查培养环境和设备的无菌状态，适当添加抗生素，及时处理受污染的细胞。