P815小鼠肥大细胞瘤细胞系是从DBA/2小鼠的肥大细胞瘤中分离出来。P815细胞最初是在小鼠体内检测到的，之后被培养成稳定的细胞系，广泛用于免疫学研究。

P815细胞特性特征

• 分子特征：产生溶菌酶（lysozyme）、缺乏抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用

• 吞噬特征：能够吞噬乳胶微球和小粒乳汁、不能吞噬酵母聚糖或卡介苗

• P815细胞对硫酸右旋糖苷、脂多糖（LPS）或结核菌素纯蛋白衍生物（PPD）不敏感，这些物质不能抑制其生长

• P815细胞经检测为肢骨发育畸形病毒（鼠痘）阴性

• 基因表达特征：表达溶菌酶基因

P815小鼠肥大细胞瘤细胞参数表

细胞名称	P815细胞（小鼠肥大细胞瘤细胞）
细胞别称	小鼠肥大细胞瘤细胞; P-815; P 815
来源	小鼠DBA/2肥大细胞瘤
生长特性/形态	悬浮生长，部分轻微贴壁；圆形
细胞代数	10代以内
安全等级	生物安全等级1;
保藏机构	ATCC (TIB-64); DSMZ (ACC-1)
培养基	RPMI-1640; 10% FBS; 1% P/S
培养条件	37°C; 95%空气 + 5%CO2
传代信息	比例1:2; 每周3次; 密度80%-90%时传代
倍增时间	约18-22小时
染色体/基因	染色体数34~41; 表达溶菌酶
吞噬特性	可吞噬乳胶微球和小粒乳汁; 不吞噬酵母聚糖或卡介苗
细胞毒性	无抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用
药物反应	对硫酸右旋糖苷、LPS或PPD不敏感
病毒/支原体	肢骨发育畸形病毒(鼠痘)阴性; 支原体阴性
冻存/运输	无血清冻存液，液氮储存; 干冰或常温运输
细胞数量	1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管
用途	仅供科研使用
传代方法	收集悬浮细胞，贴壁细胞可用刮刀刮下

P815小鼠肥大细胞瘤细胞培养教程

P815细胞接收处理

• 收到T25瓶装P815细胞后，用75%酒精消毒瓶壁。

• 将T25瓶置于37°C培养箱中放置2-4小时，以稳定P815细胞状态。

• 在显微镜下观察P815细胞状态，并拍照记录。

P815细胞传代方法

• P815细胞悬浮收集：收集培养瓶中的P815细胞悬浮细胞、对于轻微贴壁的P815细胞，可以使用细胞刮刀轻轻刮下。

• 离心：以1000rpm离心5分钟，收集P815细胞、弃去上清液，保留P815细胞沉淀。

• 重悬：加入1-2ml新鲜完全培养基重悬P815细胞。

• 传代：按1:2到1:4的比例分配P815细胞到新的培养容器中、每个新容器中加入8ml新鲜完全培养基。

P815细胞传代密度和频率

• 当P815细胞密度达到80%-90%时进行传代。

• 通常每周传代3次。

• 以20万P815细胞/mL密度开始新的培养。

特别注意事项

• 首次传代：建议使用1:2的比例以保证P815细胞的健康生长。

• 收集悬浮细胞：传代时需确保收集培养基中的所有悬浮P815细胞。

• 培养基更换：运输用的培养基不可继续用于P815细胞培养，需更换为新配制的完全培养基。

P815细胞冻存细胞复苏

• 收到冻存管后，立即转入液氮或直接进行复苏。

• 复苏后，将P815细胞悬液转移到离心管。

• 以1000rpm离心5分钟。

• 加入10-15ml新鲜培养液重悬P815细胞。

• 分配到两个T25培养瓶内进行P815细胞培养。

P815细胞观察和维护

• 显微镜观察：定期在显微镜下观察P815细胞状态。

• pH值稳定：保持培养基pH值稳定，必要时更换培养基以维护P815细胞的健康。

• 防止污染：操作时应保持无菌环境，注意防止P815细胞培养中的细菌或真菌污染。

P815细胞常见问题

• 细胞贴壁：部分P815细胞可能会轻微贴壁，这是正常现象。

• 细胞密度控制：需维持适当的P815细胞密度，以保证细胞的健康生长。

• 培养基问题：使用运输用的培养基继续培养P815细胞可能会影响细胞生长。

• 污染风险：如其他细胞培养一样，需要注意防止P815细胞培养中的细菌或真菌污染。