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产品名称:GT1-1细胞株(小鼠垂体瘤细胞株)
产品详细说明
  • 来源:垂体瘤;SV40转化
  • 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
  • 培养基:DMEM/F12+5% HS+5% FBS+1%P/S
  • 其他:神经内分泌特性,能够合成和分泌GnRH;表达多种神经递质受体,如GABA受体、谷氨酸受体等

GT1-1细胞是GT1细胞系的一个亚克隆,GT1来源于稳定表达SV40大T抗原的转基因小鼠产生的可以分泌促性腺激素释放激素LHRH的肿瘤。GT1-1细胞保留了GnRH神经元的许多特性,能够合成pro-LHRHmRNA,并向培养基中分泌LHRH免疫反应物质。

GT1-1细胞株特性特征

  • GT1-1细胞能够表达pro-LHRH mRNA.

  • GT1-1细胞可以向培养基中分泌具有LHRH(也称为GnRH)免疫反应性的物质.

  • 携带SV40大T抗原基因,导致了下丘脑GnRH神经元的不受控制生长,保留了原代GnRH神经元的许多基因特征.

  • GT1-1细胞能够合成和分泌促性腺激素释放激素(LHRH/GnRH).

  • GT1-1细胞保留了原代GnRH神经元的许多功能特征

GT1-1细胞株参数表

细胞名称 GT1-1细胞株(小鼠垂体瘤细胞株)
细胞别称 GT1-1细胞;GT11; 小鼠垂体瘤细胞
种属来源 小鼠
组织来源 垂体
生长特性 贴壁生长
细胞形态 上皮细胞样
生物安全等级 1
细胞规格 1×10^6 cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测
培养基 DMEM/F12+8%胎牛血清+2%马血清(两种血清均需灭活,灭活方法:42度,30分钟)
培养条件 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
冻存条件 无血清冻存液,液氮储存
分子特征 表达pro-LHRH mRNA,分泌LHRH样免疫反应性物质
基因特征 携带SV40大T抗原基因
功能特性 能够合成和分泌促性腺激素释放激素(LHRH/GnRH)

培养教程

GT1-1小鼠垂体瘤细胞株培养教程

细胞复苏

  • 解冻步骤: 将含1mL GT1-1细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速解冻。

  • 重悬: 加入4mL预热的完全培养基,轻轻混合均匀。

  • 离心: 以1000 RPM离心4分钟,弃去上清液。

  • 重悬: 用1-2mL新鲜培养基重悬GT1-1细胞。

  • 培养: 将细胞悬液转移至培养瓶中,添加适量培养基,并放置于37°C、5% CO2的培养箱中培养过夜。

  • 换液: 次日更换培养基并检查GT1-1细胞的密度。

细胞传代

  • 传代时机: 当GT1-1细胞密度达到80-90%时进行传代,通常每周2次。

  • 操作步骤: 吸除旧培养基,用不含钙、镁的PBS轻轻冲洗细胞1-2次。

  • 消化: 加入1mL 0.25% Trypsin-0.53mM EDTA消化液,37°C孵育1-2分钟,观察GT1-1细胞是否脱落。

  • 终止消化: 轻敲培养瓶,加入少量培养基终止消化。

  • 重悬: 补加6-8mL新鲜培养基,轻轻吹打混匀。

  • 分装: 按1:2至1:6的比例将GT1-1细胞悬液分装至新的培养瓶中,补加新鲜培养基至适当体积。

细胞冻存

  • 冻存液: 使用无血清冻存液。

  • 分装: 将GT1-1细胞悬液分装至冻存管中。

  • 降温: 缓慢降温至-80°C,然后转移至液氮中长期保存。

注意事项

  • 观察: 定期检查GT1-1细胞的形态和生长状况。

  • 无菌操作: 确保操作过程无菌,以避免污染。

  • 支原体检测: 定期进行支原体检测。

  • 传代次数: 控制GT1-1细胞的传代次数,以维持细胞特性。

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