NCTC clone 929（也称为 L cell 或 L-929）小鼠成纤维细胞是菌株L的首个克隆，菌株L是第一个在连续培养中建立的细胞之一。

L929细胞用于细胞系毒性试验。

L929细胞染色体数约为66，范围＝65至68之间。每个中期传播中，细胞通常具有20到30个标记染色体，在77/100个细胞中观察到了具有二次收缩的长中心染色体。

L929细胞的遗传学信息基于ATCC的初始种子库存。NCTC clone 929 细胞具有致瘤性，在免疫抑制小鼠中表现出此特性。

L929细胞对多种病毒具有易感性，包括水泡性口腔炎病毒、格拉斯哥水泡性口腔炎病毒和奥赛脑心肌炎病毒。对电子虫病病毒（鼠痘）呈阴性反应。

L929细胞特性

• 起源：菌株L的首个克隆，菌株L是最早在连续培养中建立的细胞之一

• 常用于：细胞毒性试验

• 染色体数：约为66，范围65至68之间

• 标记染色体：每个中期传播中通常有20到30个标记染色体

• 特殊染色体现象：77/100个细胞中观察到具有二次收缩的长中心染色体

• 遗传学信息：基于ATCC的初始种子库存

• 致瘤性：在免疫抑制小鼠中具有致瘤性

• 病毒易感性：水泡性口腔炎病毒、格拉斯哥水泡性口腔炎病毒、奥赛脑心肌炎病毒

• 对电子虫病病毒（鼠痘）的反应：阴性

L929细胞参数表

L929小鼠成纤维细胞常规培养传代流程

注意：严格遵守无菌操作

材料：

• L929小鼠成纤维细胞培养瓶、PBS缓冲液、0.25% EDTA、完全培养基、10 mL移液器、显微镜、细胞培养箱

步骤：

• 从L929细胞的原培养瓶中吸出培养基，用PBS缓冲液润洗细胞两次，以清除残留培养基。

• 向细胞中加入12 mL 0.25% EDTA 的胰酶消化液，注意控制消化时间，通常在12分钟。在显微镜下观察消化情况，当细胞边缘开始缩小、贴壁运动时（不要消化到细胞漂浮），立即去除胰酶。

• 向细胞中加入6~8 mL 完全培养基，并轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落、吹散。

• 取出部分L929细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，加入适量的完全培养基。将培养皿/瓶放入培养箱中培养。

• 定期检查培养基的 pH 值变化情况，并根据需要定期换液。

• 当L929细胞密度达到70-80%时，重复以上传代操作，或者进行细胞冻存。

注意事项：

• 操作过程中保持无菌条件，避免细菌、真菌等污染。

• 控制胰酶消化时间，避免细胞过度消化或损伤。

• 定期检查细胞的形态和生长情况，确保L929细胞健康。

• 每次传代前，检查培养皿/瓶的状态，确保无破损或污染。