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您的当前位置:首页 > 产品信息 > 小鼠细胞系 > 3T3-L1 小鼠胚胎成纤维细胞
产品名称:3T3-L1 小鼠胚胎成纤维细胞
产品详细说明
  • 来源:胚胎
  • 细胞特征:贴壁细胞 ,成纤维细胞样
  • 培养基:生长培养基:DMEM+10% NCS+1% P/S
  • 其他:当细胞从快速分裂到长满且接触抑制时,3t3l1细胞经历前脂肪向脂肪样的转变

3T3-L1细胞来源小鼠胚胎成纤维细胞的连续亚株,具有成纤维细胞样的特性,喜贴壁生长。3T3-L1细胞用于研究与糖尿病、肥胖和相关疾病机制。

3T3-L1小鼠胚胎成纤维细胞在培养过程中表达胰岛素,并具备产生甘油三酯的能力。当细胞经历快速分裂到长满且接触抑制时,会发生从前脂肪向脂肪样的转变。培养液中高血清含量的存在有助于促进细胞内脂肪的积累。

3T3-L1细胞特征

  • 3T3-L1细胞是通过克隆分离得到的3T3(Swiss小白鼠)的连续亚株,源自小鼠胚胎成纤维细胞。

  • 细胞特性:成纤维细胞样,贴壁生长。

  • 3T3-L1细胞表达胰岛素,并产生甘油三酯。

  • 细胞从快速分裂到长满且接触抑制时,3T3-L1细胞会经历前脂肪向脂肪样的转变。

  • 培养液中高血清含量可促进细胞内脂肪的积累。

  • 3T3-L1细胞主要用于研究与糖尿病、肥胖和相关疾病相关的基本细胞机制。

  • 3T3-L1细胞鼠痘病毒呈阴性。

  • 3T3-L1细胞可作为转染宿主细胞。

3T3-L1细胞参数表

细胞名称 3T3-L1小鼠胚胎成纤维细胞
别称 3t3l1; 3T3 L1; 3T3L1; 3T3-L1 ad; NIH-3T3-L1; NIH3T3-L1;
种属来源 小鼠
组织来源 胚胎
细胞形态 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
生物安全等级 BSL-1
细胞特性 具有产生甘油三酯的能力;经历前脂肪向脂肪样的转变;培养液中高血清含量可促进细胞内脂肪的积累;鼠痘病毒检测结果呈阴性。
基因表达 胰岛素,表达
培养条件 DMEM+10%CS(小牛血清)+1% P/S
培养环境 空气,95%;二氧化碳 (CO2),5%
冻存条件 55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO;液氮
推荐传代比例 1:3-1:4
推荐换液频率 2-3次/周
特殊说明 1. 起始接种密度应在3000/cm2;2. 避免细胞完全融合;3. 冻存复苏后需要温和离心收集细胞悬液;4. 在DMEM(含 1.5g/LNaHCO3)培养基中生长良好。
应用 用于研究糖尿病、肥胖和相关疾病的基本细胞机制,作为转染宿主细胞。


研究发现,噻唑烷二酮类化合物(TZDs)如罗格列酮和吡格列酮在2μM浓度下不影响3T3-L1细胞的活性或细胞凋亡,但可以显著增加细胞内脂质积累,进而促进脂肪细胞的分化,并通过增加Pparγ和NF-κB特异性蛋白的表达来证实脂肪细胞的完全分化。此外,3T3-L1脂肪细胞衍生的外囊泡对胰岛β细胞和人胰岛的存活、增殖和功能有正负两面的影响,取决于脂肪细胞的状态和脂肪组织的来源。在健康状态下,外囊泡对胰岛β细胞有益,但在肥胖和胰岛素抵抗等病理条件下,外囊泡会加剧胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能障碍的进展。

培养教程

3T3-L1细胞培养说明

培养基和培养条件

  • 使用DMEM培养基,含有10% FBS (新生牛血清)

  • 培养密度控制在40-60%的汇合度,避免细胞过度汇合

  • 细胞在快速增值阶段时,每2-3天更换一次培养基

  • 汇合度达到70-80%时进行传代

注意事项

  • 为避免细胞聚集,等待细胞消化时,不要通过击打或摇晃瓶子来刺激细胞,难以消化的细胞可置于37°C条件下

  • 注意血清类型,避免使用胎牛血清,以免导致细胞分化

  • 如果培养过程中出现空泡,优先考虑环境压力,如培养基成分、二氧化碳浓度、营养物质等是否合适

  • 使用胎牛血清可能会造成细胞分化,因此应尽量避免使用

分化诱导过程

  • 细胞生长至融合期,出现接触抑制

  • 添加诱导剂,如0.5mM IBMX、1μmol/L 地塞米松和1-10μg/mL 胰岛素,培养48小时

  • 换成只含胰岛素的培养基,培养48小时

  • 最后换成不含诱导剂的常规培养基,每2天换液1次

  • 用油红O染色法鉴定细胞是否诱导成功

传代方法和冻存条件

  • 传代比例为1:2至1:6,每周2次

  • 冻存条件为90%完全培养基 + 10% DMSO,液氮冻存

STR鉴定及相关

STR点位信息

8-3 17,21
6-7 12,15
5-5 13,15
X-1 26
1-2 13
7-1 25.2,29
8-1 15,16
1-1 10,15
19-2 12
15-3 20.3
12-1 19
6-4 15.3
4-2 19.3
3-2 14
2-1 9
13-1 15.1
11-2 15
17-2 12,15
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