A549/DDP是一种人源非小细胞肺癌耐药细胞系,由A549细胞系经过顺铂(DDP)诱导筛选而成,对顺铂显著的耐药性。原始的A549细胞系来源于一名58岁白人男性的肺腺癌组织。在A549/DDP细胞系中,继承了A549细胞通过胞苷二磷酸胆碱途径合成富含不饱和脂肪酸的卵磷脂的能力。
A549/DDP细胞特性特征
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耐药性:a549/ddp细胞对顺铂(DDP)具有显著的耐药性。
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脂质代谢特征:a549/ddp细胞能通过胞苷二磷酸胆碱途径合成含有高含量不饱和脂肪酸的卵磷脂。
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转染特征:转染了GFP(绿色荧光)蛋白,便于荧光显微镜下观察和追踪。
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蛋白质组学特征:通过比较蛋白质组学研究,A549/DDP细胞与A549细胞在蛋白表达谱上存在显著差异。鉴定出13种差异表达蛋白质,这些蛋白与细胞代谢、结构、解毒和DNA修复、以及信号转导等相关。
A549/DDP细胞参数表
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细胞名称
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A549/DDP人肺腺癌顺铂耐药株
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英文名称
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A549/DDP
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种属
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人(Homo sapiens)
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组织来源
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肺癌(肺腺癌)
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细胞类型
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上皮细胞
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来源患者
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58岁白人男性
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建系者
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D.J.Griad
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细胞形态
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上皮细胞样,多角形,贴壁生长
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荧光标记
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GFP(绿色荧光蛋白)
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培养基
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DMEM高糖 + 10% FBS + 1% P/S + 1000ng/ml DDP
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培养温度
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37°C,95%空气,5%二氧化碳
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传代密度
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细胞密度达80%-90%时可传代
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传代比例
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首次传代建议1:2,后续可根据生长情况调整
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耐药维持
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需添加500-1000ng/ml DDP
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换液频率
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每2-3天更换一次培养基
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冻存液
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90% FBS + 10% DMSO(无需添加DDP)
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储存温度
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液氮气相
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耐药性
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对顺铂(DDP)具有显著耐药性
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代谢特征
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能通过胞苷二磷酸胆碱途径合成含高含量不饱和脂肪酸的卵磷脂
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倍增时间
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约24-30小时
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蛋白质组
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与A549细胞相比存在13种差异表达蛋白
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耐药蛋白
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可能涉及药物外排、DNA修复、细胞凋亡抑制等相关蛋白
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细胞鉴定
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STR分型鉴定
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无菌检测
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细菌、真菌、支原体检测均为阴性
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病原体检
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HIV、乙型肝炎、丙型肝炎检查均为阴性
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生物安全
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二级(BSL-2)
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操作要求
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需在二级生物安全柜内操作
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研究领域
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肺癌研究、耐药机制研究、抗肿瘤药物筛选、联合用药研究
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应用限制
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仅供科学研究使用,不可用于临床
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首次培养
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复苏后先用不含DDP的培养基,待细胞状态稳定后再逐步添加DDP
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观察方法
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可通过荧光显微镜观察GFP表达
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耐药检测
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定期进行顺铂敏感性测试,确保耐药性维持
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