MC38小鼠结肠癌细胞的来源和建系过程：由M.H.Tan等使用1, 2-二甲基肼诱导C57BL/6小鼠产生结肠腺癌，然后从肿瘤组织中获取结肠腺癌上皮细胞系，去除成纤维细胞得到MC38细胞系。

MCA-36结肠腺癌细胞系也是通过相同的诱导方法在BALB/c小鼠中建立的，不同之处在于对胰酶敏感，因此筛选方法有所不同。在体外培养条件下，MC38细胞传代10次，MCA-36细胞传代12次后均未观察到形态学变化。

体内实验结果显示，将MC38和MCA-36纯化的肿瘤细胞分别在BALB/c和C57BL/6小鼠皮下再植，肿瘤生长无组织学变化。

MC38小鼠结肠癌细胞产品参数表

细胞名称	MC38小鼠结肠癌细胞
细胞别称	MC38；MC38-LU；小鼠结肠癌细胞
种属来源	C57BL/6小鼠
组织来源	结肠
生长特性	贴壁
特性	上皮样，贴壁生长
细胞形态	MC38细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因
药物筛选浓度	MC38-LUC细胞puro药筛浓度为1. 0ug/ml，培养过程中可不用再添加puro ，如若担心抗性随着传代时间降低，可定期用0.5ug/ml浓度puro维持
细胞规格	1×10^6 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管
培养基	DMEM+10% FBS+PS+1%NEAA+1%丙酮酸钠+1%谷氨酰胺+1%HEPES
培养条件	气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
冻存条件	液氮冻存（冻存液基础培养基+20%FBS+10%DMSO）
运输条件	干冰运输（2ml冻存管）或活细胞运输（T25瓶）
分子标记	荧光素酶
支原体检测	无
建系方法	使用1, 2-二甲基肼诱导C57BL/6小鼠产生结肠腺癌，然后从肿瘤组织中获 取结肠腺癌上皮细胞系，去除成纤维细胞得到MC38细胞系
体外传代	MC38细胞传代10次，MCA-36细胞传代12次后未观察到形态学变化

MC38细胞（小鼠结肠癌细胞）培养教程

培养液配方：

• 45ml DMEM+5ml 胎牛血清+500ul 双抗

冻存液配方：

• 90% 血清+10% DMSO

细胞复苏：

• 将保存在-80℃中的MC38细胞冻存管置于37℃水浴锅中融化。

• 将融化的细胞转移到5 mL离心管中，以180 g离心5分钟，然后弃上清。

• 加入1 mL细胞培养液（DMEM + 10% FBS）重悬MC38细胞。

• 将悬浮的细胞转移到8 mL培养皿中。

• 在37℃、5% CO2条件下培养MC38细胞。

细胞换液：

• 弃去培养液，用1 ~2ml的PBS清洗MC38细胞，洗净。

• 弃掉PBS，加入8 mL培养液。

细胞传代：

• 取对数生长期的MC38细胞，用1 mL PBS洗净。

• 加入1 mL胰酶消化，等MC38细胞变圆时加入1 mL细胞培养液停止消化。

• 将消化后的MC38细胞培养液转移到5 mL离心管中，以180 g离心5分钟，然后弃上清。

• 加入2 mL细胞培养液重悬MC38细胞，并将其转移到新的培养皿中。

• 在37 ℃、5% CO2条件下培养MC38细胞。

细胞冻存：

• 取对数生长期的MC38细胞，用1 mL PBS洗净。

• 加入1 mL胰酶消化，等MC38细胞变圆时加入1 mL细胞培养液停止消化。

• 将消化后的MC38细胞培养液转移到5 mL离心管中，以180 g离心5分钟，然后弃上清。

• 加入1 ml细胞冻存液（90% 血清 + 10% DMSO）。

• 置于冰箱冻存。