CT26.WT小鼠结肠癌细胞是一种来源于N-亚硝基-N-甲基氨基甲酸酯（NNMU）诱导的未分化结肠癌细胞系，克隆形成并命名为CT26.WT的细胞系。

CT26.WT细胞源于小鼠结肠腺癌组织，是以N-亚硝基-N-甲基脲烷（NNMU）诱导形成的未分化结肠癌细胞。通过逆转录病毒载体LXSN的稳定转化，形成了致死性的亚克隆CT26.CL25。这一病毒载体包含有lacZ基因、编码肿瘤相关抗原（TAA）和beta半乳糖苷酶。CT26.CL25细胞能够表达肿瘤相关抗原和beta半乳糖苷酶，而在正常小鼠中，CT26.WT细胞与CT26.CL25细胞的生长速率和致死率基本一致。

CT26.WT细胞可用于研究宿主免疫反应。2001年7月，提交给ATCC的培养物曾被发现被支原体污染，但经过BM Cycline治疗21天治愈后代，支原体检测结果均为阴性。

CT26细胞还可以用于3D细胞培养。

CT26.WT小鼠结肠癌细胞产品参数表

培养基和冻存条件准备：

• 准备RPMI-1640培养基、10%优质胎牛血清、1%双抗。

• 培养条件应为气相95%空气和5%二氧化碳，温度维持在37℃，培养箱湿度保持在70%-80%。

• 冻存液的配方为90%血清和10%DMSO，需要现配现用，并将CT26.WT细胞冻存于液氮中。

细胞处理：

• 细胞复苏： 将含有1mL CT26.WT细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中解冻，移入15ml离心管中与4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。将所有CT26.WT细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜，第二天换液并检查细胞密度。

• 细胞传代： 当CT26.WT细胞密度达到80%-90%时，即可进行传代培养。

• 细胞冻存： 待CT26.WT细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，先进行细胞计数并消化处理，然后加入DMSO至最终浓度为10%。最后按每1ml数量分配到冻存管中，确保CT26.WT细胞数目大于1x10^6个细胞冻存。

注意事项：

• 收到CT26.WT细胞后，请检查是否有漏液，如有异常情况，请及时联系我们。

• 所有操作需在二级生物安全台内进行，并且务必注意防护措施。

• 废液及接触过CT26.WT细胞的器皿需进行灭菌处理后再丢弃。