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您的当前位置:首页 > 产品信息 > 小鼠细胞系 > B16F10黑色素瘤细胞(b16小鼠皮肤黑色素瘤细胞)
产品名称:B16F10黑色素瘤细胞(b16小鼠皮肤黑色素瘤细胞)
产品详细说明
  • 来源:器官:皮肤;品系:C57BL/6J;疾病:黑色素瘤
  • 细胞特征:贴壁细胞,梭形细胞样;上皮样细胞样
  • 培养基:生长培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S;使用DMEM培养时可能出现黑色素快速积累,推荐使用RPMI-1640完备培养
  • 其他:B16-F10细胞是B16-F0细胞的亚系。

B16-F10小鼠黑色素瘤细胞源自患有黑色素瘤的C57BL/6J小鼠的皮肤组织,其细胞形态呈现出纺锤形和上皮样的特征。B16-F10细胞系始于1954年,由美国缅因州杰克逊实验室(Jackson Laboratory)的研究人员建立。

B16-F10细胞系的建立是由对C57BL/6J小鼠皮肤组织的初级培养和体内移植实验。在适当的培养环境下,研究人员成功地从小鼠皮肤组织中分离出黑色素瘤细胞,并将其移植到同种小鼠体内,形成了原发性肿瘤。后通过成功分离出的原发性肿瘤,建立了B16-F10细胞系。

特征和生物学性质

B16-F10细胞系表现出肿瘤细胞的特征,具有在脾脏、肝脏和肺部等器官产生转移的能力。它们是产生黑色素的上皮细胞,形态上表现为上皮细胞样和纺锤形细胞样,细胞大小约为15.4μm。此外,B16-F10细胞系具有贴壁生长的特性,适合于在培养皿中以单层形式生长。

B16F10-LUC荧光素酶标记亚系

B16F10-LUC是B16-F10细胞系的一个荧光素酶标记亚系,通过慢病毒转染方式引入了荧光素酶基因。可用于荧光素酶活性检测和活体动物成像实验。B16F10-LUC细胞系稳定地表达荧光素酶,无需添加抗生素维持,为研究人员提供了一种方便的方法来监测细胞活性和转移过程。

B16F10/B16-F10黑色素瘤细胞产品参数表 

名称 B16-F10小鼠黑色素瘤细胞
别称 B16F10; B16/F10; B16 melanoma F10
种属 小鼠
组织来源 皮肤
肿瘤类型 黑色素瘤细胞
生物安全等级 BSL-1
建系时间 1954年
细胞形态 纺锤形和上皮样细胞
生长特性 贴壁生长
冻存条件 冻存液:55%基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO,温度:液氮
培养基 RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S
推荐传代比例 1:3 - 1:4
推荐换液频率 2-3次/周
特殊注意事项 使用DMEM培养时可能出现黑色素快速积累,推荐使用RPMI-1640完备培养
特殊背景介绍 B16-F10细胞是B16-F0细胞的亚系。
生长条件 气相:95%空气 + 5% CO2,温度:37°C
细胞大小 约为15.4μm
推荐传代方法 1:2至1:3,每周3次
荧光素酶标记特性 Luciferase B16-F10细胞稳定表达萤火虫荧光素酶。
药物筛选浓度 B16F10-LUC细胞puro药筛浓度为1.0ug/ml,培养过程中可不用再添加puro,如若担心抗性随着传代时间降低,可定期用0.5ug/ml浓度puro维持
Luciferase活性检测 可用作萤火虫荧光素酶活性检测中的阳性对照,也可用于活体动物成像实验。
肿瘤转移能力 具有在脾脏、肝脏和肺部转移的能力
细胞代数 p3-p8


培养教程

培养基选择:

  • B16-F10 细胞在 DMEM (含 1.5g/L NaHCO3) 培养基中生长良好,但大部分品牌的 DMEM 含有较高浓度的 NaHCO3 (3.7g/L)。若使用 DMEM (3.7g/L NaHCO3) 培养基培养细胞,需要提高 CO2 浓度 (7%-10%)。

  • 推荐的基础培养基是 DMEM (高糖) 培养基。

细胞培养操作:

  • 复苏细胞:将含有 1 mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 4mL 培养基混合均匀。离心后吹匀,然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜。

  • 细胞传代:细胞密度达 80%-90% 时进行传代培养,具体操作包括细胞解离、补充培养基等步骤。

  • 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存,具体操作包括细胞收集、冻存液添加、冻存等步骤。

培养注意事项:

  • 注意观察培养瓶是否完好,培养液是否有异常现象。

  • 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息。

  • 建议前 3 天拍几张细胞照片,记录细胞状态,以便技术沟通交流。

B16 细胞的特点和应用:

  • B16-F10 细胞源于 C57BL/6J 小鼠黑色素瘤,具有高增殖率、侵袭性强等特点,被广泛用于转移研究、肿瘤模型建立、基因编辑等方面。

  • 可通过基因编辑技术如 CRISPR/Cas9 进行基因敲除、点突变等操作,用于探究肿瘤发生机制、治疗靶点等。

优缺点:

  • 优点包括易于成长、快速增殖、致瘤性强等。

  • 缺点包括缺乏人的相关性、细胞异质性等。

STR鉴定及相关

STR点位信息

18-3 15,16
6-7 15
5-5 16,20
X-1 28
1-2 19,20
7-1 26.2
8-1 16,17
1-1 17,18,19
19-2 13,14
15-3 22.3,23.3
12-1 17,18
6-4 18,19
4-2 20.3,21.3
3-2 14,15
2-1 16
13-1 17.1,18.1
11-2 16,17
17-2 15,16,17
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