IEC-18细胞系是一种来源于大鼠（Rattus norvegicus）回肠的上皮细胞系，由A. Quaroni于1979年建立，广泛应用于生物医学研究，尤其是在肠道生理学和药物代谢领域。IEC-18细胞系取自小肠末端的回肠部位，具有典型的上皮细胞形态，适合贴壁生长，是研究肠道功能和药物作用机制的理想模型。

IEC-18细胞特性特征

• IEC-18细胞在生物医学研究中被广泛用于研究肠道相关的基因表达。例如：

• 转运蛋白：如钠依赖性葡萄糖转运蛋白（SGLT1），参与营养物质的吸收。

• 酶类：如肠道消化酶，帮助分解食物成分。

• IEC-18细胞通常表达多种上皮标志蛋白，例如：

• 粘附蛋白：如E-cadherin，参与细胞间的粘附和信号传导。

• 细胞骨架蛋白：如角蛋白，维持上皮细胞的结构完整性

IEC-18细胞参数表

细胞名称	IEC-18细胞（大鼠回肠细胞）
细胞别称	IEC 18; IEC18; Intestinal Epithelioid Cell line No. 18
种属来源	大鼠（Rattus norvegicus）
组织来源	回肠（小肠的一部分）
生长特性	贴壁生长
细胞形态	上皮细胞样
特别注意	在DMEM(1.5g/L NaHCO3)培养基中生长良好，使用DMEM(3.7g/L NaHCO3)时需提 高CO2浓度至7%-10%
细胞代数	10代以内
细胞规格	1×10^6 cells/T25或1 mL冻存管
支原体检测	无
生物安全等级	1
培养基配方	DMEM(1.5g/L NaHCO3) + 10% FBS + 0.01 mg/ml牛胰岛素 + 抗生素 （如青霉素和链霉素）
培养条件	气相：95%空气 + 5%二氧化碳；温度：37℃
传代密度标准	当细胞密度达到80%-90%时进行传代培养。
传代比例建议	首次传代建议1:2（即1个T25瓶传至2个T25瓶或2个6cm皿）。
冻存液配方	无血清冻存液，液氮储存
基因表达情况	表达与肠道功能、吸收及代谢相关的基因，如转运蛋白和消化酶。

IEC-18大鼠回肠细胞培养教程

收货处理

• 检查状态：收到IEC18细胞后，立即检查培养瓶的完整性，确保培养液无泄漏、浑浊或其他污染现象。

• 消毒：用75%乙醇擦拭培养瓶表面，减少IEC18细胞在实验中的污染风险。

• 细胞稳定：在不打开瓶盖的情况下，将T25培养瓶置于37°C培养箱中静置2-4小时，使IEC18细胞适应培养环境。

细胞复苏

• 从液氮中取出冻存管，用75%乙醇消毒表面后，将冻存管放入37℃水浴中快速摇晃解冻，约2分钟。

• 解冻后的IEC18细胞悬液转入离心管中，加入4 mL培养基混匀，在1000 rpm离心3分钟，去除DMSO上清。

• 将IEC18细胞重悬于1-2 mL培养基中，轻轻混匀后转入含适量培养基的培养瓶中，置于培养箱中过夜培养，使IEC18细胞逐步适应培养环境。

传代操作

• 当IEC18细胞达到瓶底80%-90%时，可进行传代。合适的细胞密度有助于后续IEC18细胞的生长。

• 弃去培养上清，使用不含钙镁的PBS洗涤IEC18细胞1-2次。

• 加入1 mL 0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA溶液，在37℃下孵育1-2分钟，直至IEC18细胞变圆并轻松脱落。

• 加入新鲜培养基终止消化，轻轻吹打形成细胞悬液。

• 将IEC18细胞悬液按1:2比例分装至新的培养瓶中，加入8 mL培养基，并保持适当密度以进行贴壁培养。

冻存操作

• 收集IEC18细胞悬液，置于无菌离心管中，1000 rpm离心4分钟，去除上清，用PBS轻轻洗涤。

• 将IEC18细胞重悬于90% FBS和10% DMSO的冻存液中，细胞密度设定为1-2 × 10⁶ cells/mL。

• 每支冻存管装1 mL IEC18细胞悬液并贴上标记，以标明细胞系名称及冻存日期。

• 将装有IEC18细胞的冻存管放入程序降温盒中，以-1°C/分钟速率降温后，先置于-80°C冰箱中保存24小时，再转入液氮罐中长期储存。

复苏操作

• 从液氮罐中取出冻存的IEC18细胞，将冻存管放入37°C水浴中迅速解冻。

• 解冻后的IEC18细胞悬液转入离心管，加入10 mL培养基，1000 rpm离心3分钟，去除DMSO。

• 复苏后的IEC18细胞置于培养箱中过夜，使细胞适应新环境后进入稳定培养。

注意事项

• 细胞状态：IEC18细胞在运输和解冻过程中可能出现部分损失，收到后应尽快复苏培养。

• 培养环境：将IEC18细胞置于37°C、5% CO₂湿润环境中培养，确保培养基定期更换，维持细胞的健康状态。

• 无菌操作：所有操作均需在无菌环境中进行，避免污染。

• 记录保存：每次传代和冻存操作中，需记录IEC18细胞的密度、传代次数及操作时间，以确保实验可重复性和细胞状态稳定。