CTX细胞通常是指大鼠脑部提取的原代星形胶质细胞，可能来自不同发育阶段或脑部区域，主要为I型星形胶质细胞，形态上呈现上皮细胞样，具有贴壁生长特性。CTX细胞广泛应用于基础神经生物学研究，尤其适用于药物筛选等实验需求。

CTX细胞系特性特征

• 标志性蛋白：GFAP（胶质纤维酸性蛋白）、S100β；

• CTX细胞可能表达多种与星形胶质细胞相关的表面标志物，如：CD44、GLAST（谷氨酸转运体）。

CTX细胞系参数表

CTX大鼠脑星形胶质细胞系培养教程

CTX细胞复苏步骤

• 取出CTX细胞冻存管放入37℃水浴中，快速摇晃以完成解冻，尽量避免细胞在水浴中长时间暴露。

• 将解冻后的CTX细胞悬液加入含4-6 mL完全培养基的离心管，1000 rpm离心3-5分钟，弃去上清液。

• 用新鲜培养基将CTX细胞重悬后，转移至含6-8 mL培养基的培养瓶中，置于37℃培养箱中过夜培养。

• 第二天在显微镜下观察CTX细胞的贴壁状态和生长状况，如有大量悬浮的死细胞，应及时更换培养基。

CTX细胞传代

• 当CTX细胞密度达到80%-90%时，需进行传代。若过密，CTX细胞的形态和活性可能受影响，建议适时传代。

• 洗涤：弃去上清液后，用无钙镁的PBS冲洗CTX细胞1-2次。

• 消化：加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，于37℃下消化1-2分钟。当大部分CTX细胞变圆并即将脱落时，加入3-4 mL含10% FBS的培养基终止消化。

• 离心：将悬浮的CTX细胞转入离心管，1000 rpm离心3-5分钟后弃去上清液。

• 分装：将CTX细胞按1:2比例分装到新培养瓶中，补充6-8 mL新鲜完全培养基，继续培养。

CTX细胞冻存

• 为保证实验的持续性，建议在CTX细胞培养前3代时进行一批冻存操作。

• 冻存液：使用90%胎牛血清和10% DMSO为冻存液。

• 细胞混合：将CTX细胞悬液与冻存液按1:1比例混合，分装至冻存管并标记好信息。

• 冷冻条件：将装有CTX细胞的冻存管置于-80℃冷冻过夜，次日转移至液氮中储存以供长期保存。