INS-1大鼠胰岛细胞瘤细胞

INS-1细胞最初源自X射线照射的移植胰岛瘤的大鼠，是一种肿瘤细胞系。其特征包括不规则形态和贴壁生长的生长特性。

INS-1大鼠胰岛细胞瘤细胞与NIT-1小鼠β细胞系高度相关，从患有胰岛素瘤的10周龄雌性小鼠的Langerhans胰岛中分离出来，应用于胰岛β细胞功能研究领域。INS-1细胞具有胰岛素阳性特征，能够合成胰岛素原I和II，在研究胰岛素分泌、胰岛素信号传导、胰岛素受体功能等方面具有重要价值。

这些小鼠是通过在大鼠胰岛素启动子控制下转基因SV40大T抗原来自发发展成β腺瘤。在第18代中，大多数NIT-1细胞显示阳性胰岛素染色，而胰高血糖素阳性细胞不到5%，没有观察到生长抑素或胰腺多肽呈阳性。胰岛素分泌对NIT-1细胞培养基中的葡萄糖浓度有反应。MHC I类、II类和ICAM-1 mRNA的组成型表达较低，但干扰素γ治疗后两者的表达均显著增加。I类信使RNA刺激伴随着I类抗原表达和H-2.39特异性神秘I类产物诱导的增加。尽管诱导了信使RNA，但MHC II类抗原未被诱导。NIT-1细胞显示了分化的小鼠β细胞的超微结构特征，包括发育良好的粗糙内质网、广泛的高尔基体和β颗粒。细胞会脱落一种成熟的回归型C型逆转录病毒。这种逆转录病毒能够感染其他Fv-1n小鼠细胞系，因此需要注意避免交叉感染。

注意：NIT-1细胞不会形成融合的单层，但它们会以相当密集的阵列形成漂亮的单层细胞集落。

INS-1大鼠胰岛细胞瘤细胞参数表

参数	INS-1细胞	NIT-1细胞 ( 与INS-1细胞高度相关）
名称	INS-1 (大鼠胰岛细胞瘤细胞)	NIT-1 (小鼠β细胞系)
别称	INS1	NIT1
细胞来源	胰岛素瘤；雄性；NEDH；666日龄	胰岛素瘤；10周龄雌性小鼠的 Langerhans胰岛
细胞形态	不规则形	不规则多角形
细胞类型	肿瘤细胞	β细胞系
生长特性	贴壁细胞	贴壁生长
生物安全等级	1	N/A
培养环境	空气，95%；CO2，5%	空气，95%；CO2，5%
培养条件	RPMI-1640＋10% FBS＋50μmol/L β-mercaptoethanol＋1% P/S	RPMI-1640+10%FBS+50μmol/L β-mercaptoethanol+1%P/S
细胞组织来源	大鼠胰腺	N/A
冻存条件	55%基础培养基+40%FBS+5%DMSO；液氮	60%基础培养基+30%FBS+10%DMSO；液氮
收录	LONZA	N/A
细胞特性	胰岛素阳性；可合成胰岛素原I和II	胰岛素阳性；可合成胰岛素原I和II
细胞描述	来源于X射线照射的移植胰岛瘤的大鼠；不规则形态	来源于患有胰岛素瘤的小鼠；不规则多角形
注意事项	N/A	注意避免逆转录病毒交叉感染
生长方式	贴壁生长	N/A
细胞简介	胰岛素阳性，可用于胰岛β细胞功能研究	胰岛素阳性，可用于胰岛β细胞功能研究
培养液	RPMI-1640+20% FBS+0.05mM β-mercaptoethanol+1% P/S	N/A
传代比例	N/A	1:3-1:6，每2-3天换液一次
传代周期	N/A	48-72 h
冻存温度	N/A	液氮

培养教程

细胞培养

从冻存细胞中迅速取出所需数量的细胞。
快速解冻细胞，并将其转移至预热的培养基中。
将细胞培养在37°C、5% CO2的培养箱中。
注意避免用力敲击或摇晃培养瓶，以防止细胞团形成。

细胞分裂与传代

细胞在适宜的培养条件下会逐渐增殖。
当细胞达到80-90%的密度时，可进行细胞分裂和传代。
使用无菌技术将细胞转移到新的培养瓶中。

细胞冻存

使用含有10% DMSO的冻存液将细胞冻存于液氮罐中。
快速降温至-80°C，然后转移至液氮罐中长期保存。

注意事项

细胞培养过程中对胎牛血清质量要求高，推荐使用优质胎牛血清。
在培养基中添加β-巯基乙醇。
PUMC细胞贴壁能力较弱，换液时不需冲洗细胞。
在细胞消化时，避免用力敲击或摇晃培养瓶，以免形成细胞团。