人神经母细胞瘤细胞SHSY5Y细胞系

SH-SY5Y细胞系源于1970年，由纪念斯隆-凯特琳癌症中心的June L Biedler等科学家从一名4岁女童的神经母细胞瘤的骨髓穿刺样本建立。最初，此样本细胞被命名为SK-N-SH细胞系。后来，通过经历三次克隆（SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y），SH-SY5Y亚系最终形成。

SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞显示中等水平的多巴胺-β-羟基酶活性，主要用于研究神经科学和神经系统疾病。其形态呈现上皮细胞样，具有多个短而细的细胞突起，有时会聚集成细胞团块。

SH-SY5Y细胞抗原表达：血型A；Rh+

SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞参数表

细胞名称	SH-SY5Y（人神经母细胞瘤细胞）
细胞别称	SHSY5Y; SHSY-5Y; SH-Sy5y; SK-SH-SY5Y; SY5Y
种属来源	人
组织来源	脑神经母细胞瘤，转移部位骨髓
疾病特征	脑神经母细胞瘤
细胞形态	上皮样
生长特性	半贴壁（贴壁和悬浮同时存在）
培养基	43%MEM+43%F12+10%FBS+1% MEM NEAA+1%丙酮酸钠+1% GlutaMAX-1+1%P/S
传代比例	1:2-1:4
换液周期	48-72 小时
培养条件	气相：95%空气 + 5% CO2，温度：37℃
冻存条件	55%基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO，液氮储存
质量检测	细菌、真菌、支原体检测均为阴性
细胞特性	1970年由神经母细胞瘤患者的转移骨瘤灶细胞SK-N-SH经三次克隆得到中等水平的多巴胺-β-羟基酶活性表达多巴胺-β-羟基酶等神经元特有酶
应用	科研使用，广泛用于神经科学研究 - PD（帕金森病）发病机制研究药物筛选、毒性测试、免疫组化染色、转染宿主等
特征	细胞呈上皮细胞样态，形成神经母细胞簇 - 细胞聚集成细胞丛

SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞应用

神经科学研究： SH-SY5Y细胞作为神经细胞模型，用于研究神经发育、神经细胞生长和分化、突触传递等。
神经系统疾病研究：由于其在多巴胺-β-羟基酶活性上的表现，SH-SY5Y细胞被广泛应用于研究帕金森病等神经系统疾病。
药物筛选和毒性研究： SH-SY5Y细胞常被用于评估药物的毒性和疗效，及进行新药筛选。
3D细胞培养： SH-SY5Y细胞用于构建三维细胞培养模型。

人神经母细胞瘤细胞SHSY5Y潜在问题

根据最新研究，部分SH-SY5Y细胞可能存在被小鼠细胞污染的问题，这可能会对实验结果产生影响。因此，在使用SH-SY5Y细胞时，需要进行相关的质量控制和检测，以确保实验结果的可靠性和准确性。

培养教程

人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y培养方案

1. 培养基选择和配制

建议使用MEM/F12或DMEM/F12培养基，含有NEAA、丙酮酸钠、GlutaMAX-1。
培养基需添加稳定性的胎牛血清（FBS），浓度通常为10-20%。
加入抗生素/抗菌素（如青霉素/链霉素）来预防细菌污染，浓度为50-100单位/毫克/升。

2. 细胞接收与处理

细胞收到后，立即将培养瓶放置于37°C的培养箱中，避免温度变化和震荡。
若细胞出现皱缩或脱落，可将培养瓶静置2-4小时，以稳定细胞状态。

3. 细胞传代频率与接种密度

建议每5-7天传代一次细胞，以维持细胞活性和稳定生长。
启动接种时，推荐密度为8.0×10^4 至 1.5×10^5 活细胞/cm^2。
继代培养时，密度应控制在4.0 × 10^4 至 1.0×10^5 活细胞/cm^2。

4. 形态调节与成团处理

对于形态不理想的细胞，可尝试调整培养基组分或添加生长因子（如神经营养因子）。
若细胞成团严重，可采取低密度接种、使用多聚赖氨酸包被的培养器皿、更换优质血清等方法。

5. 常见问题解决

若细胞出现皱缩或脱落，可通过常温静置和离心处理。
细胞生长缓慢时，应注意控制密度和培养基选择。
成团严重时，可尝试不同的培养条件或调整培养基成分。

6. 注意事项

传代过程中避免连续消化细胞，传代时消化时间不宜过长，通常1-3分钟即可。
传代时应轻柔处理细胞，避免对细胞造成机械刺激。
培养过程中要注意细胞密度控制，密度过高或过低都会影响细胞生长状态。

7. 培养环境与条件

培养箱内温度应保持在37°C，CO2浓度为5%。
定期检查培养箱内的湿度和CO2浓度，确保细胞处于适宜的环境中。
培养器皿应在无菌条件下操作，定期更换培养基以避免细菌或真菌污染。

8. 培养实验操作安全

在培养操作中，应遵守实验室安全操作规程，穿戴实验室服、手套和护目镜。
废弃的培养废液和耗材应按照生物危险废物处理。

注意事项：该细胞为半贴壁半悬浮细胞，请注意离心收集细胞悬液；请勿直接倒掉细胞培养液。