LN-18细胞系是一种人胶质母细胞瘤细胞系，于1976年从一名65岁的白人男性胶质母细胞瘤患者的右颞叶中分离。
LN-18细胞系以其上皮样形态和贴壁生长特性著称，增殖速度较快，适合用于体外实验。LN-18细胞系因其独特的生物学特性成为研究胶质母细胞瘤的重要模型，提供了宝贵的实验材料用于相关生物医学研究。

LN-18细胞特性特征

• 致瘤性：LN-18细胞系在裸鼠体内能够形成肿瘤，表明其具有致瘤性。

• 癌症基因状态：TP53：突变型，具体为TGT（Cys）到TCT（Ser）密码子238突变；PTEN：野生型；p16/CDKN2A：已删除；p14ARF：已删除。

• 抗原表达：LN-18细胞表达HLA-A2、A9、B5、BW35和DRW3等抗原。

• 基因表达：LN-18细胞主要表达纤维连接蛋白（fibronectin）。

• 胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和S100蛋白：对这两种蛋白呈阴性。

• 在Fas配体刺激下，LN-18细胞会在16小时内发生凋亡。

• 嘌呤霉素以剂量依赖的方式杀死这些细胞。

• Bcl-2蛋白对Fas配体诱导的细胞死亡提供保护，但对嘌呤霉素诱导的凋亡保护作用有限

LN-18细胞参数表

LN-18人胶质母细胞瘤培养教程

细胞传代步骤

• 准备工作：在无菌条件下进行操作，确保所有器材和培养基已准备妥当（如T25或T75培养瓶）。

• 更换培养液：每2-3天更换一次培养液，即使未观察到培养基颜色变化。使用巴氏吸管轻轻吸取部分上清液，避免扰动细胞，加入等体积的新鲜培养基。

• 吸出原培养液后，加入约2mL的PBS（磷酸盐缓冲液），轻轻晃动以润洗细胞，然后吸出PBS。

• 加入约1mL的0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），轻轻晃动以确保细胞完全浸润。

• 将培养瓶放入37℃的培养箱中进行消化，观察细胞是否开始变圆且之间出现间隙，通常消化时间为3-5分钟。

• 加入3mL含血清的培养基终止消化，并轻轻吹打使细胞脱壁形成悬浮液。

• 收集细胞悬液并以1200rpm/min离心3分钟，弃去上清。

• 加入新鲜培养基，轻轻重悬细胞后转移至新的培养瓶中。

• 传代比例：通常采用1:2至1:6的传代比例，具体可根据细胞密度进行调整。

冻存步骤

• 将细胞悬液调整至浓度为0.5-1.0×10^6 cells/mL。

• 将冻存管放入-80℃冰箱预冷24小时，然后转移至液氮储存以确保细胞的长期保存。

复苏步骤

• 复苏前准备：准备好含有10% FBS的完全培养基，以便于细胞复苏后的培养。

• 将冻存管在37℃水浴中迅速解冻，轻轻摇晃使细胞均匀分布。

• 加入4mL新鲜培养基与细胞悬液混合均匀。

• 在1000rpm下离心4分钟，弃去上清液。

• 补加1-2mL新鲜培养基，并将细胞转移至新的培养瓶中。

注意事项

• LN-18细胞对氧气、细胞密度及营养物质非常敏感，需定期检查和更换培养液，以防细胞死亡。

• 建议将培养瓶平放，以增大空气交换面积，确保培养液高度不超过3mm，从而提供适宜的生长环境。