U138MG细胞（人脑神经胶质瘤细胞）

U-138MG人脑神经胶质瘤细胞系是从一名47岁白人男性的IV级胶质母细胞瘤中分离出来，由J. Ponten等人在1966年至1969年间建立。U138MG细胞属于神经胶质瘤细胞，广泛应用于神经科学领域，特别是在肿瘤生物学、药物筛选以及治疗响应研究中。

U-138MG细胞具有典型的上皮样形态，呈贴壁生长，其细胞遗传学特征显示多倍体（从超二倍体到五倍体）状态，茎系染色体接近三倍体。染色体组成高度一致，标记染色体包括t(11;5)、t(8q;4)、t(19;18)等。在所有的中期细胞中都检测到4号染色体。U138MG细胞系已被多家生物样本库收录，包括ATCC、DSMZ、ECACC等。

U138MG细胞特性特征

抗原表达：U138MG细胞系表达A型血抗原，Rh+，同时具有多种同工酶活性，如AK-1、ES-D、G6PD等。
致瘤性：U138MG细胞在免疫抑制小鼠中不致瘤，表明其在体内的致瘤能力较低。
遗传相似性：U-138MG与U-118MG细胞在细胞遗传学上非常相似，至少共享六条衍生标记染色体。两者在VNTR（变异数量串联重复）和STR（短串联重复）模式上也表现出相似性。
支原体污染：1974年3月观察到支原体污染并得到治愈。
U138MG细胞形态上与 HTB-14细胞不同，增殖速率较慢。
同工酶:AK-1，1；ES-D，1；G6PD，B；GLO-I，1-2；Me-2，1；PGM1，1；PGM3，1

U138MG细胞参数表

细胞名称	U138MG细胞（人脑神经胶质瘤细胞）
别称	U-138MG; U-138-MG; U138-MG; U138MG; U138MG; U138; 138MG; 138MG
细胞来源	47岁白人男性，星形胶质母细胞瘤（IV级）
组织来源	脑肿瘤细胞
性别/年龄	男 / 47岁
形态特征	多边形
生长方式	贴壁生长
倍增时间	47小时（PubMed=9842975）；约70小时（DSMZ=ACC-291）
抗原表达	A型血，Rh+
同工酶	AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1, PGM3
致瘤性	在免疫抑制小鼠中不致瘤
培养基	DMEM（高糖）+ 10% 胎牛血清 + 1% P/S
培养条件	37°C，5% CO₂，95%空气
换液频率	每2-3天
传代周期	每2-4天
传代比例	1:3 - 1:5
冻存液	90% 胎牛血清 + 10% DMSO
冻存浓度	1×10^6 cells/ml
生物安全等级	BSL-1
供应限制	仅供科研使用
保藏机构	ATCC, DSMZ, ECACC, BCRJ, JCRB等
污染情况	1974年观察到支原体污染并治愈
与U-118MG的关系	在细胞遗传学上非常相似，至少共享六条衍生标记染色体

培养教程

U138MG人脑神经胶质瘤细胞培养教程

细胞复苏步骤

快速解冻：将冷冻的U138MG细胞从液氮中取出，立即放入37°C水浴中，轻轻晃动1-2分钟，直至细胞完全解冻。
稀释细胞：将解冻后的U138MG细胞悬液移入含有9 ml预热的完全培养基的离心管中，轻轻混匀。
离心：以1000 rpm离心5分钟，弃去上清液。
重悬细胞：将U138MG细胞沉淀重悬于5 ml完全培养基中。
培养：将细胞悬液转移至T25培养瓶中，置于37°C、5% CO₂培养箱内进行培养。

细胞传代步骤

检查汇合度：当U138MG细胞汇合度达到70%-80%时，进行传代操作。
细胞洗涤：弃去旧培养基，用无钙镁的PBS缓冲液轻轻洗涤U138MG细胞1-2次。
细胞消化：加入0.25%胰蛋白酶（1-2 ml），37°C培养箱中消化1-2分钟，直至细胞开始脱落。
终止消化：加入5 ml完全培养基终止胰蛋白酶的作用。
细胞收集与离心：将U138MG细胞悬液转移至离心管中，1000 rpm离心5分钟，弃去上清。
细胞重悬：将U138MG细胞重悬于适量完全培养基中（约5-10 ml）。
分瓶：按1:3至1:5的比例进行分瓶培养，补充培养基至适量（5-8 ml）。
继续培养：将新的U138MG细胞培养瓶置于37°C、5% CO₂培养箱中。

细胞冻存步骤

制备冻存液：按90%胎牛血清（FBS）和10%二甲基亚砜（DMSO）的比例配制冻存液。
收集细胞：传代后将U138MG细胞重悬于冻存液中，细胞浓度约为1×10^6 cells/ml。
分装：将U138MG细胞悬液分装至冻存管中，每管1 ml。
程序冷冻：使用程序降温仪，以每分钟1°C的降温速度冷冻U138MG细胞，最终储存在液氮罐中。