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产品名称:SF295细胞系(人XG恶性胶质瘤细胞)
产品详细说明
  • 来源:脑部
  • 细胞特征:贴壁细胞 , 成纤维细胞样
  • 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
  • 其他:不表达胶质标记物GFAP或谷氨酰胺合成酶,实阳性表达神经纤维蛋白-1

SF-295细胞系是从患者的左额叶恶性胶质瘤组织中分离并培养得到的,属于人类恶性胶质母细胞瘤细胞系。SF295细胞在培养过程中表现出超三倍体和胶质样形态。SF295细胞系常用于评估药物和分子调节剂对胶质母细胞瘤的影响。

SF295细胞特性特征

  • 不表达: 胶质标记物GFAP(胶质纤维酸性蛋白)和谷氨酰胺合成酶

  • 阳性表达: 神经纤维蛋白-1(Neurofibromin-1,NF1),这是多形性胶质母细胞瘤中最常见的突变因子之一

  • 致瘤性: SF295细胞在无胸腺小鼠中不致瘤

SF295细胞系参数表

细胞名称 SF295细胞系(人XG恶性胶质瘤细胞)
别称 SF-295 Cell;  SF295; SF-295;  SF 295
种属
组织来源 左额叶肿瘤(left frontal lobe tumor)
细胞类型 恶性胶质瘤细胞
生物安全级别 2级
细胞形态 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
倍增时间 27-36小时
细胞活力 通常保持在95%左右(使用台盼蓝排除法测定)
培养基 RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(青霉素/链霉素)
培养环境 37°C,5% CO2
传代方法 1:2-1:3,每2-3天换液一次
冻存条件 90% FBS + 10% DMSO
复苏条件 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入培养基混合均匀
不表达 胶质标记物GFAP(胶质纤维酸性蛋白)、谷氨酰胺合成酶
阳性表达 神经纤维蛋白-1(NF1)
染色体特征 超三倍体
基因突变 NF1(神经纤维蛋白-1)突变
致瘤性 在无胸腺小鼠中不致瘤
无菌检测 细菌、酵母、支原体检测均为阴性
病原体检查 HIV、乙型肝炎、丙型肝炎检查均为阴性
研究用途 肿瘤生物学研究、药物筛选、抗癌药物研究、基因功能研究
特殊应用 评估药物和分子调节剂对胶质母细胞瘤的影响

培养教程

SF295人XG恶性胶质瘤细胞系培养教程

SF-295细胞复苏

  • 将SF-295细胞冻存管在37°C水浴中快速解冻(约1分钟)

  • 将SF-295细胞悬液转移到含有5mL预热培养基的离心管中

  • 以1000 RPM离心5分钟

  • 弃去上清,用新鲜培养基重悬SF-295细胞

  • 将SF-295细胞转移到培养瓶中,放入培养箱中培养

日常SF-295细胞培养

  • 每天观察SF-295细胞形态和生长状况

  • 每2-3天换液一次

  • 当SF-295细胞密度达到80-90%时进行传代

SF-295细胞传代方法

  • 弃去旧培养基

  • 用PBS轻轻冲洗SF-295细胞1-2次

  • 加入适量胰蛋白酶-EDTA溶液,37°C消化3-5分钟

  • 用显微镜观察SF-295细胞是否脱落

  • 加入含血清的培养基终止消化

  • 以1000 RPM离心5分钟

  • 弃去上清,用新鲜培养基重悬SF-295细胞

  • 按1:2或1:3的比例将SF-295细胞接种到新的培养瓶中

SF-295细胞冻存

  • 使用90% FBS + 10% DMSO的冻存液

  • 将SF-295细胞悬液分装到冻存管中

  • 使用程序降温盒,在-80°C冰箱中存放过夜

  • 次日转移到液氮中长期保存

SF-295细胞培养注意事项

  • 保持无菌操作,定期进行支原体检测

  • SF-295细胞生长较快,建议使用较大的培养瓶

  • 避免SF-295细胞过度生长或“抱团”现象

  • 定期检查SF-295细胞活力,保持在95%左右

SF-295细胞的特殊处理

  • 进行药物处理或基因转染实验时,确保SF-295细胞生长状态良好

  • 实验前进行SF-295细胞计数,确保实验条件的一致性

SF-295细胞质量控制

  • 定期进行SF-295细胞形态学观察

  • 检测SF-295细胞关键蛋白表达(如神经纤维蛋白-1)

  • 监测SF-295细胞生长曲线和倍增时间

STR鉴定及相关

Amelogenin X
CSF1PO 10,13
D2S1338 15,20
D3S1358 16,18
D5S818 11,12
D7S820 9,13
D8S1179 13,14
D13S317 10
D16S539 12,13
D18S51 15,18
D19S433 12,15
D21S11 28,30
FGA 22,25
Penta D 13,14.4
Penta E 5,7
TH01 9.3 (Cosmic-CLP=905985)
9.3,10 (AddexBio=C0005005/415; Millipore=SCC289; PubMed=19372543)
TPOX 8,11
vWA 16,17
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