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您的当前位置:首页 > 产品信息 > 人源细胞系 > NCI-H661人大细胞肺癌细胞
产品名称:NCI-H661人大细胞肺癌细胞
产品详细说明
来源:肺;大细胞肺癌患者的淋巴结
细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
培养基:生长培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S

其他:NCI-H661细胞表达特征:角蛋白表达阳性、波形蛋白表达阳性、p53 mRNA高表达

NCI-H661是1982年来自一名43岁白人男性大细胞肺癌患者的淋巴结中建立的人大细胞肺癌细胞系,可用于癌症研究。

NCI-H661细胞为超六倍体,具有模态数142,范围在130到153之间。每个细胞有70多条标记染色体,包括t(1p10q)、del(1)(q11/q12)、6q+、2q+、der(20)t(12;20)(q11;q13),其中一些标记物在每个细胞中存在2到3个拷贝。大多数细胞也有5到10个微染色体(稳心样)。结构正常的N2、N4和N9染色体缺失,同时存在两个拷贝的X染色体和多个拷贝的Y染色体。

NCI-H661细胞具有以下特性和特征

NCI-H661细胞分子特征

  • 角蛋白和波形蛋白纤维染色呈阳性

  • 神经丝三联体蛋白染色呈阴性

  • p53 mRNA表达水平明显高于正常肺细胞

  • 缺乏产生粘液和鳞状分化的亚显微结构和生化证据

NCI-H661细胞其他特征

  • NCI-H661细胞表达特征:角蛋白表达阳性、波形蛋白表达阳性、p53 mRNA高表达

  • 基因特征:可能存在p53基因的点突变或小的变异,但没有出现总体性的结构DNA崎变

  • NCI-H661细胞倍增时间约60小时,生长速度相对较慢

  • NCI-H661细胞形态呈上皮细胞样,生长特性为贴壁生长

  • 同工酶:AK-1,1;ES-D,1;G6PD,B;GLO-I,1-2;Me-2,0;PGM1,1;PGM3,1

NCI-H661细胞参数表

细胞名称 NCI-H661人大细胞肺癌细胞
细胞别称 NCI-H661; h661, H-661, NCIH661
ATCC编号 HTB-183
组织来源 人肺
疾病类型 大细胞肺癌
建系年份 1982年
患者信息 43岁男性
样本来源 胸腔积液
生长形态 贴壁生长 / 上皮细胞样
倍增时间 约60小时
细胞代数 10代以内
生物安全等级 1级
蛋白表达 角蛋白:阳性;波形蛋白:阳性;神经丝三联体蛋白:阴性
p53 mRNA表达 高于正常肺细胞
其他特征 粘液产生:无证据;鳞状分化:无证据
p53基因 可能存在点突变或小的变异
培养基 RPMI 1640 + 10% 胎牛血清 (FBS) + 青霉素/链霉素 (PS)
培养环境 温度:37°C;CO2浓度:5%;气相:95%空气 + 5%二氧化碳
传代密度 细胞密度达80%-90%
传代比例 1:02
冻存液 无血清冻存液 ; 液氮储存
检测结果 支原体检测:阴性;STR鉴定:正确
用途/限制 仅限于科学研究 / 不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用

培养教程

NCI-H661人大细胞肺癌细胞培养教程

NCI-H661细胞复苏

  • 从液氮中取出NCI-H661细胞冻存管,迅速置于37°C水浴中快速解冻。

  • 将NCI-H661细胞悬液转移到含有预热完全培养基的离心管中。

  • 以1000 rpm离心5分钟,弃去上清。

  • 用新鲜完全培养基重悬NCI-H661细胞,并转移到培养瓶中。

  • NCI-H661细胞接种密度约为2-3 × 10^4 cells/cm²。

  • 将NCI-H661细胞置于37°C、5% CO2培养箱中培养。

NCI-H661细胞日常培养

  • 每2-3天更换一次NCI-H661细胞培养基。

  • 观察并记录NCI-H661细胞生长状态,包括细胞形态和密度。

NCI-H661细胞传代

  • 当NCI-H661细胞密度达到80%-90%时进行传代。

  • 用PBS洗涤NCI-H661细胞层1-2次。

  • 加入适量胰蛋白酶-EDTA溶液,在37°C消化2-3分钟。

  • 加入完全培养基终止消化,轻轻吹打使NCI-H661细胞分散。

  • 以1000 rpm离心5分钟,弃去上清。

  • 用新鲜完全培养基重悬NCI-H661细胞,并按1:2的比例进行传代。

NCI-H661细胞冻存

  • 收集对数生长期的NCI-H661细胞。

  • 制备冻存液:90%完全培养基 + 10% DMSO。

  • 调整NCI-H661细胞密度至1-2 × 10^6 cells/mL。

  • 将NCI-H661细胞悬液分装到冻存管中。

  • 使用程序降温盒或梯度降温,最终转移到液氮中长期保存。

NCI-H661细胞培养注意事项

  • 定期检查NCI-H661细胞是否有污染。

  • 观察NCI-H661细胞形态,保持上皮细胞样特征。

  • 控制传代次数,建议使用10代以内的NCI-H661细胞。

  • 定期进行支原体检测。

  • 严格遵守无菌操作规程。

特殊说明

  • NCI-H661细胞的倍增时间约为60小时,相对生长较慢。

  • 培养过程中注意观察NCI-H661细胞的贴壁状态。

常见问题解答

  • 传代比例对NCI-H661细胞实验结果的影响:

  • 传代比例为1:2有助于保持适当的NCI-H661细胞密度,确保细胞正常生长。

  • 过高的传代比例可能导致NCI-H661细胞密度过低,生长缓慢,影响细胞活力。

  • 过低的传代比例可能导致NCI-H661细胞过度密集,影响细胞形态和代谢特性。


  • 确保NCI-H661细胞健康状态的方法:

  • 定期观察NCI-H661细胞形态,保持上皮细胞样特征。

  • 使用10代以内的NCI-H661细胞,避免长期传代。

  • 定期进行支原体检测,确保无污染。

  • 严格遵守无菌操作规程。


  • 不同培养基对NCI-H661细胞生长特性的影响:

  • 推荐使用RPMI 1640基础培养基,添加10% FBS和PS。

  • 在这种标准培养条件下,NCI-H661细胞的倍增时间约为60小时。


  • NCI-H661细胞对化疗药物的敏感性:

  • 具体化疗药物的敏感性信息可能需要进一步实验验证。

  • NCI-H661细胞可能对肺癌常用化疗药物表现出特定的反应模式。

STR鉴定及相关

Amelogenin X,Y
CSF1PO 10
D2S1338 17
D3S1358 15,16 (ATCC=HTB-183; PubMed=25877200)
16 (CCRID)
D5S818 11
D7S820 8,10
D8S1179 10
D13S317 11
D16S539 12
D18S51 11 (CCRID)
11,14 (ATCC=HTB-183)
D19S433 13,14
D21S11 31,33.2
FGA 20
Penta D 11,13
Penta E 12,13
TH01 8
TPOX 8
vWA 17


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