SF-763细胞系来源于一位36岁女性的脑肿瘤组织（人脑胶质瘤）。这类肿瘤由神经胶质细胞演变而来，是最常见的原发性恶性脑肿瘤之一。

SF-763细胞参数表

SF-763人脑瘤细胞培养教程

细胞复苏步骤

• 解冻SF763细胞：

• 将含有1mL SF763细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中，轻轻摇晃，确保在1-2分钟内完全解冻。

• 解冻后，用75%酒精消毒SF763细胞冻存管外表面，并迅速移入无菌操作台。

  
  

• 离心和重悬：

• 将解冻后的SF763细胞悬液转移至一个15mL离心管中，加入5mL预热至37℃的培养基，混合均匀。

• 以1000 RPM离心5分钟，弃去上清液。

• 补加4-6mL预热的培养基，轻轻混匀SF763细胞悬液。

  
  

• 接种SF763细胞：

• 将SF763细胞悬液转移至培养瓶中，加入适量的培养基（一般为10mL）。

• 将培养瓶放置于37℃、5% CO₂培养箱中培养。

细胞培养步骤

• 培养基：使用SF763细胞专用培养基，或1640培养基加10%小牛血清。确保培养基在使用前预热至37℃。

• 培养条件：在37℃、5% CO₂环境中培养SF763细胞。

• 传代培养：当SF763细胞生长至80-90%汇合时进行传代。传代比例为1:2至1:4，每3-4天传代一次。

  
  

• 吸弃旧培养基，用PBS（磷酸盐缓冲液）洗涤SF763细胞一次。

• 加入适量的胰蛋白酶-EDTA溶液（0.25%胰蛋白酶，0.02% EDTA）消化SF763细胞，消化时间一般为1-2分钟。

• 当显微镜下观察到SF763细胞开始圆形脱落时，加入5-10mL培养基终止消化。

• 轻轻吹打SF763细胞悬液使细胞完全分散，转移至离心管中，1000 RPM离心5分钟。

• 弃去上清液，补加适量培养基重悬SF763细胞。

• 按1:2至1:4比例接种到新的培养瓶中，加入适量培养基，放回培养箱中继续培养。

细胞保存步骤

• 将SF763细胞培养至对数生长期，收集细胞并离心。

• 配制冻存液（90%培养基+10%DMSO）。

• 将SF763细胞重悬于冻存液中，按1mL/管分装到冻存管中。

• 将冻存管置于程序降温盒中，-80℃冻存过夜。

• 第二天转移至液氮罐中长期保存。