LN229细胞是人类胶质母细胞瘤细胞系，具有上皮样形态、建立于1979年，来源于一名60岁白人女性患者的右额顶枕皮质，常用于神经科学和脑肿瘤研究。

其肿瘤基因特征包括突变的p53基因（CCT（Pro）--> CTT（Leu），密码子98处突变）、野生型PTEN基因，以及已删除的p16和p14ARF肿瘤抑制基因。

LN229细胞特性

• LN-229细胞在裸鼠体内具有致瘤性，能够形成肿瘤。

• 肿瘤基因：p53+（突变，CCT（Pro）-->密码子98处的CTT（Leu）突变）；PTEN+（野生型）；p16-（已删除）；p14ARF-；（已删除）

• LN229细胞表现出突变的p53（TP53）和p16和p14ARF肿瘤抑制基因中可能的纯合缺失。它们具有野生型PTEN基因。

• Fas配体刺激能在16小时内导致LN229细胞凋亡。

• 嘌呤霉素以剂量依赖的方式杀死LN229细胞。

• Bcl-2蛋白对Fas配体诱导的细胞死亡有保护作用，但对嘌呤霉素诱导的细胞凋亡保护作用有限。

• LN229细胞以贴壁方式生长，形成单层培养。

• 需要特定的培养条件，包括适当的培养基、血清比例和细胞因子支持。

LN229细胞参数表

LN229人胶质母细胞瘤细胞培养教程

• 观察LN229细胞密度：当LN229细胞密度达到80%-90%时，即可进行传代培养。

• 准备工作：

• 准备完全培养基：90% DMEM + 10% FBS + 1% PS（青霉素/链霉素）。

• 准备PBS（不含钙、镁离子）和0.25% Trypsin-0.02% EDTA消化液。

• 消化LN229细胞：

• 弃去培养上清，用PBS润洗LN229细胞1-2次。

• 加入1 mL消化液（0.25% Trypsin-0.02% EDTA），使其覆盖所有LN229细胞。

• 弃去多余消化液，将培养瓶置于37°C培养箱中消化1分钟。

• 在显微镜下观察LN229细胞消化情况，当大部分LN229细胞变圆并脱落时，迅速取出。

• 终止消化：轻敲培养瓶，加入少量完全培养基终止消化。

• 收集LN229细胞：

• 补加6-8 mL/瓶培养基，轻轻打匀。

• 将LN229细胞悬液转入无菌离心管中。

• 1000 rpm离心4分钟，弃去上清液。

• 重悬LN229细胞：用1-2 mL新鲜完全培养基重悬LN229细胞沉淀。

• 传代接种：首次传代建议1:2比例，即1个T25瓶传2个T25瓶或2个6cm皿。之后可根据LN229细胞生长情况调整为1:3 - 1:5的比例。