来源:肺腺癌,非小细胞肺癌;转移部位:胸腔积液
细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
培养基:生长培养基:RPMI-1640+10% FBS+1%P/S
其他:NCI-H647细胞能够产生人绒毛膜促性腺激素(hCG)的β亚单位以及肿瘤相关抗原
NCI-H647细胞系是从一名56岁不吸烟的白人男性患者(患有3A期腺鳞癌,曾接受放射治疗)的肺癌组织中分离的。NCI-H647细胞来源于转移性胸腔积液。具备大细胞肺癌的特征,包括快速生长以及在免疫功能低下小鼠体内形成肿瘤的能力。
NCI-H647细胞模态数为89,范围在74至176之间,并表现出t(3p14;11p15)染色体易位。
NCI-H647人肺癌细胞特性
NCI-H647人肺癌细胞参数表
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细胞名称
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NCI-H647人肺癌细胞
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细胞别称
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NCI-H647人肺癌细胞、 H647、H-647、H647ell、NCIH647
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细胞来源
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肺;转移部位:胸腔积液;1983年10月建系
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患者信息
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人 / 男 / 56岁
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疾病类型
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3A期,腺鳞癌;非小细胞肺癌
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生物安全等级
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BSL1
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形态生长特性
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上皮细胞样 / 贴壁生长
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培养条件
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95%空气,5%二氧化碳;37℃
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倍增时间
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约3天
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培养基
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RPMI-1640+10% FBS+1%P/S
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传代换液频率
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1:3-1:6 ;每周2次
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保存条件
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低温避光; 1×10^6 cells/T25培养瓶
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保藏机构
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ATCC
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供应限制
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仅供科研使用
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特殊特征
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细胞捐赠者不吸烟
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产生物质
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人绒毛膜促性腺激素(hCG)β亚单位、肿瘤相关抗原
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初始检查
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收到后检查是否漏液,如有请拍照反馈
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初始培养
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显微镜下确认生长状态,去封口膜,37℃培养2-3h
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培养液处理
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弃去原培养液,换新鲜完全培养基
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培养教程
NCI-H647人肺癌细胞培养教程
NCI-H647细胞接收与处理
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收到NCI-H647细胞后,检查培养瓶是否有漏液情况,如有,拍照并联系供应商。
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在显微镜下观察NCI-H647细胞生长状态。
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去除培养瓶的封口膜,将T25瓶置于37°C培养箱中静置2-3小时,以稳定NCI-H647细胞状态。
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换培养液:弃去运输中的原培养液,换上新鲜的完全培养基。
NCI-H647细胞传代
换液频率
观察与记录
冻存
注意事项
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无菌操作:在所有操作过程中保持无菌环境,避免NCI-H647细胞污染。
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污染检查:定期检查NCI-H647细胞是否有细菌、真菌或支原体污染,使用经过过滤的培养基和试剂。
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细胞状态监测:观察NCI-H647细胞形态是否正常,细胞边缘应清晰且透亮。
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传代操作:确保适当浓度的胰蛋白酶使用,避免过度消化,传代比例合适。
常见问题及解决方法
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细胞污染:严格无菌操作,定期检测支原体,使用经过过滤的培养基和试剂。
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细胞生长缓慢或停滞:确保使用NCI-H647细胞专用培养基,定期更换新鲜培养基,检查培养箱的温度和CO2浓度。
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细胞形态异常:确保消化时间适中,传代比例合适,避免NCI-H647细胞过度密集或稀疏。
STR鉴定及相关
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Markers:
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Amelogenin
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X
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CSF1PO
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10
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D2S1338
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17,25
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D3S1358
|
17
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D5S818
|
12
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|
D7S820
|
10
|
|
D8S1179
|
11,13
|
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D13S317
|
9,11
|
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D16S539
|
9
|
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D18S51
|
12,15
|
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D19S433
|
14
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D21S11
|
28,32.2
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FGA
|
22,24
|
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Penta D
|
12,13
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Penta E
|
7
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TH01
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6,9.3
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TPOX
|
11
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vWA
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17
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