Daoy人髓母细胞瘤细胞是一种多边形细胞，从一名患有结缔组织增生性小脑髓母细胞瘤的4岁白人男性的小脑中分离出来，活检肿瘤取自后颅窝。用于神经科学研究。

Daoy细胞不具备神经元和神经胶质分化的特征。用二丁基环腺苷酸（cAMP）处理细胞不会诱导通过S100（S-100）蛋白和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）染色测量的那些特征的表达。

Daoy细胞系是模式数在93和99之间的超四倍体人类细胞系，具有较高倍性的细胞的频率为2.0%。由于干细胞染色体数量很高，对多倍体的估计是暂时的。所有细胞共有13条或更多的标记染色体，其中许多细胞有两到四个拷贝。标记物包括：t（1q5q）、t（13q；？）、15p+、7q+、der（9）t（3；9）（p21；q34）和其他8个。
在大多数细胞中，15p+有三个拷贝，der（9）有四个拷贝。一些细胞具有del（1）（p11）。正常的N12、N14、N15和N19倾向于每个细胞具有四个或更多个拷贝。大多数细胞中有两条正常的X染色体，但没有检测到正常的Y染色体。

Daoy细胞系特性

• 来源：从一名患有结缔组织增生性小脑髓母细胞瘤的4岁白人男性小脑中分离出来，活检肿瘤取自后颅窝。

• 建系：由西澳大利亚皇家珀斯医院的P.F Jacobsen于1985年建立。

• Daoy细胞是多边形细胞，是一种超四倍体人类细胞系，染色体数目不稳定。

• 致瘤性：在裸鼠体内形成可连续移植的颅内和皮下肿瘤。

• 细胞标记染色体：包括t(1q5q)、t(13q;?)、15p+、7q+、der(9)t(3;9)(p21;q34)等。

• 分化特性：原始肿瘤具有神经元和神经胶质分化特征，但在细胞系中未保留。

• 响应cAMP处理：不会诱导表达神经元和胶质细胞标记物S100和GFAP。

• 同工酶：包括AK-1、ES-D、G6PD、GLO-I、Me-2、PGM1、PGM3。

Daoy细胞系参数表

Daoy细胞系培养

细胞密度达80%-90%时传代培养

• 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗Daoy细胞1-2次。

• 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Daoy细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

• 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

• 收到Daoy细胞后首次传代推荐将细胞悬液按1:2的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或瓶中，建议冻存一支备用，后续传代根据实际情况按1:2到1:4的比例进行。

冻存步骤

• Daoy细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入1ml含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

• 4min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬Daoy细胞，根据细胞数量加入血清和DMSO，轻轻混匀，DMSO终浓度为5%，细胞密度不低于1x10^6/ml，每支冻存管冻存1ml细胞悬液，注意冻存管做好标识。

• 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮罐储存。记录冻存管位置以便下次拿取。