U251细胞系源自一位75岁的男性患者（患有胶质母细胞瘤），是一种最常见的、恶性程度最高的原发性脑肿瘤之一。脑胶质母细胞瘤通常发生在星形胶质细胞中，因此称为星形胶质瘤。

U251细胞系经过多个机构的验证，包括ECACC（European Collection of Authenticated Cell Cultures）和ATCC（American Type Culture Collection）。经STR-PCR分析，确认U251细胞与U-373 MG细胞系相同，因此将其重新命名为U-251 MG（之前被称为U-373 MG）。

U251人胶质瘤细胞是通过外植体技术从恶性胶质母细胞瘤肿瘤中提取的。

组织来源：U251细胞的来源组织是脑组织。脑组织是极其珍贵的研究材料，因为它直接反映了神经系统中发生的疾病和生理过程。

细胞分离方法：U251细胞的分离是通过外植技术进行的。外植技术是一种将组织样本从体内移植到培养皿中，并利用其中的细胞生长和繁殖的方法。在这种情况下，恶性脑肿瘤样本被外植到培养皿中，然后从中分离出U251细胞。

U251人胶质瘤细胞产品参数表

细胞名称	U251 (人胶质瘤细胞)
别称	U-251 MG; U-251-MG; U-251_MG; U251-MG; U251MG; U-251; U251; U251n; U251N; 251 MG; 251MG; 人神经胶质细胞瘤细胞
货号	SNL-095
种属	人
年龄/性别	75岁/男性
组织来源	脑组织
细胞类型	肿瘤细胞
细胞形态	成纤维细胞样
生长特性	贴壁细胞
收录机构	ATCC、ECACC
生物安全等级	1
致瘤性	在裸鼠中有致瘤性
培养基	DMEM+10% FBS+1% P/S
培养条件	气相：空气，95%；CO2，5%；温度：37℃
细胞代数	10代以内
保藏机构	ECACC; 09063001
细胞规格	1x106 cells/T25或1mL冻存管
支原体检测	无
冻存条件	无血清冻存液，液氮储存
推荐传代比例	1:2-1:4
推荐换液频率	2-3次/周
背景描述	U251细胞源自一位患者的胶质母细胞瘤组织
细胞倍增时间	~24小时
细胞简介	U251细胞系是通过外植技术从恶性胶质母细胞肿瘤中衍生而来的
特性验证	经鉴定细胞纯度高于90%，细胞角蛋白-18(CK-18)免疫荧光染色为阳性，无HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌污染
细胞应用	胶质母细胞瘤研究、肿瘤干细胞提取、基因编辑、药物筛选等

U251细胞应用

U251细胞可用于从U-251人胶质母细胞瘤细胞系中提取癌症干细胞。

U251细胞还用于研究Pax6（配对盒蛋白）相关的Dkk3（Dickkopf3）表达增加的机制、JARID1B（jumonji富含AT的相互作用域1B）在神经胶质瘤发病机制中的作用，以及Irinophore C联合替莫唑胺对胶质母细胞瘤肿瘤模型的疗效。

一、培养基和培养条件准备：

培养基成分： 使用DMEM培养基，添加10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素/链霉素（P/S）。

培养条件： U251细胞放置于37°C、5% CO2的细胞培养箱中。确保细胞在湿润的环境中培养。

二、培养操作步骤：

1. 细胞复苏：

将U251细胞冻存管放入37°C水浴中快速解冻，并将细胞悬液加入4ml培养基中。

离心细胞悬液，去除上清液，加入1-2ml培养基后轻轻悬浮。

将细胞悬液加入培养瓶中，放回培养箱中培养过夜。

2. 细胞传代：

当U251细胞密度达到80%-90%时，可进行传代培养。

用PBS轻轻洗涤细胞，加入适量的胰酶消化，消化1-2分钟后终止消化。

离心细胞悬液，去除上清液，补加培养基后悬浮。

按1:2至1:4的比例分到新的培养瓶中，补足培养基。

3. 细胞冻存：

使用含10% DMSO的冻存液，加入U251细胞悬液后混匀。

分装至冻存管中，放入程序冻存盒中，-80°C冰箱过夜，转移到液氮保存。

三、注意事项：

控制胰酶消化时间，不同品牌消化时间可能有差异。

传代过程中轻柔处理细胞，避免产生过多气泡。

冻存后及时检查U251细胞冻存活性，并进行必要的调整。