KPL-4细胞系源自一位52岁日本女性的炎性乳腺癌患者，细胞来源于胸腔积液的转移灶。炎性乳腺癌是一种罕见且高度侵袭性的乳腺癌，常伴随乳房红肿、皮肤增厚等症状，容易被误认为感染。
KPL-4细胞系呈现上皮样形态，具有贴壁生长特性，广泛用于研究乳腺癌的生物学行为和炎性乳腺癌的侵袭性特征。由于其对HER2靶向治疗的潜在敏感性，KPL-4在探索针对HER2阳性乳腺癌的治疗策略中发挥了重要作用。

KPL-4细胞特性特征

• 分子特征：KPL-4细胞ER（雌激素受体）阴性、PR（孕激素受体）阴性和ERBB2（HER2）阳性。对雌激素和孕激素不敏感，但可能对HER2靶向治疗有效。

• 表达特征：KPL-4细胞表达高水平的HER2蛋白。HER2是一种重要的肿瘤促进因子,在KPL-4细胞中过度表达可能促进肿瘤的生长和侵袭。

• 基因特征：尽管KPL-4细胞的基因突变谱尚未完全阐明,但炎性乳腺癌通常与TP53基因的突变相关。TP53是一种重要的肿瘤抑制基因,其失活可能导致细胞失去对DNA损伤的正常应答

KPL-4细胞参数表

KPL-4人乳腺癌细胞培养教程

细胞复苏步骤

• 取出冻存细胞：从液氮罐中取出装有KPL4细胞的冻存管，立即放入37°C的水浴中，快速解冻，期间轻轻摇动冻存管（约1-2分钟）。

• 解冻后处理：解冻完成后，迅速将KPL4细胞转移至含有10% FBS的RPMI-1640培养基中，混匀。

• 离心去除DMSO：将细胞以1000 rpm离心5分钟，去除含有DMSO的上清液。

• 重悬细胞：将沉淀的KPL4细胞用新鲜的RPMI-1640培养基重悬，并准备接种。

细胞培养

• 接种细胞：将重悬后的KPL4细胞以1x10^5至1x10^6 cells/ml的密度接种至预先灭菌的T-25或T-75培养瓶中。

• 培养基体积应足够覆盖细胞，通常每个T-25培养瓶使用5-10 ml培养基。

• 更换培养基：每2-3天更换一次培养基，确保KPL4细胞处于最佳生长状态，定期观察细胞形态以避免污染。更换培养基时可以用RPMI-1640培养基轻轻冲洗一次。

传代操作

• 细胞状态检查：在显微镜下观察KPL4细胞，确认细胞形态正常，未出现污染。

• 去除旧培养基：倒掉旧的培养基，并用PBS（磷酸盐缓冲液）轻轻洗涤一次。

• 胰酶消化细胞：加入适量的胰酶（Trypsin-EDTA），每个T-25瓶1-2 ml，轻轻摇匀后放置2-5分钟，直到KPL4细胞开始脱落。

• 终止消化：当细胞完全脱落后，加入等量的含10% FBS的RPMI-1640培养基，终止胰酶的作用。

• 离心和重悬：将消化后的KPL4细胞转移至离心管，以1000 rpm离心5分钟，弃去上清液，并用新鲜的培养基重悬KPL4细胞。

• 接种传代：根据实验需求，将重悬后的KPL4细胞按适当的密度重新接种于新的培养瓶中，继续培养。

细胞冻存

• 准备冻存液：使用含10% DMSO和90% FBS的冻存液，将KPL4细胞重悬。

• 分装冻存管：将KPL4细胞悬液分装至冻存管，每管约1 ml。

• 逐步降温保存：将冻存管放入冷却盒中，放置于-80°C冰箱中逐步降温，随后转移至液氮罐中长期保存。