HCC1569是一种来源于70岁黑人女性乳腺化生性癌患者的上皮细胞系。该患者的FHIT基因携带种系突变，其女儿也具有相同的突变，患者曾接受过化疗，并且没有乳腺癌的家族遗传史。肿瘤被诊断为TNM IV期3级化生性癌，在18个淋巴结中检测到4个转移，病理分类为分化不良。

HCC1569细胞系建立于1995年，历时19个月完成。HCC1569细胞系具有多倍体特性，是研究Her2/neu阳性的乳腺癌提供了重要的实验模型。

Hcc1569细胞特性特征

• 癌症基因：HER2/neu：表达阳性；p53：表达阴性，Hcc1569细胞存在p53基因突变；FHIT基因：存在种系突变，患者及其女儿均携带该突变。

• 表达特征：上皮糖蛋白2 (EGP2)：呈阳性；细胞角蛋白19：呈阳性，进一步确认其上皮性质。

• 受体表达：雌激素受体 (ER)：阴性，Hcc1569细胞系不依赖于雌激素生长；孕激素受体 (PR)：阴性，通过细胞质蛋白测定，PR的表达水平较低。

• 肿瘤特征：分化程度：细胞分化较差，通常与肿瘤的侵袭性和预后不良相关；肿瘤分期：被分类为TNM IV期3级化生癌，在18个淋巴结中发现4个转移。

Hcc1569细胞参数表

Hcc1569人乳腺癌细胞培养教程

HCC1569细胞复苏

• 从液氮罐中取出HCC1569细胞冻存管，立即置于37°C水浴中解冻，时间控制在1-2分钟内，避免长时间暴露于高温中。

• 解冻后，将HCC1569细胞转移至含有10ml RPMI 1640培养基和10% FBS的培养瓶中，轻轻混匀。

• 将培养瓶置于37°C、5% CO₂培养箱中静置4小时，等待HCC1569细胞适应新的培养环境。

培养基更换

• 4小时后，弃去含有冻存保护剂的旧培养基，注意操作时避免损伤HCC1569细胞。

• 加入新鲜的RPMI 1640培养基（含10% FBS），然后继续在37°C、5% CO₂环境下培养HCC1569细胞。

HCC1569细胞观察

• 每天使用倒置显微镜观察HCC1569细胞的生长状态，检查其形态和附壁情况。通常在24小时内，HCC1569细胞开始附壁并增殖。

• 确保HCC1569细胞形态正常，避免出现细胞漂浮或生长缓慢的现象。

HCC1569细胞传代操作

• 当HCC1569细胞生长到70%-80%融合时，进行传代操作：

• 弃去旧培养基。

• 加入适量0.25%胰酶溶液，确保HCC1569细胞层完全浸泡。

• 将培养瓶置于37°C孵育1-3分钟，观察到HCC1569细胞变得半透明并逐渐脱落。

• 弃去胰酶溶液，用含有10% FBS的RPMI 1640培养基中止消化。

• 使用移液器轻轻吹打HCC1569细胞，使其均匀分散后，以1:2至1:4的比例转移至新的培养瓶中。

HCC1569细胞冻存

• 对数生长期的HCC1569细胞可以进行冻存：

• 收集HCC1569细胞并用含10% DMSO的冻存液重悬。

• 将HCC1569细胞分装到冻存管中，并逐步降温，最后存入液氮中进行长期保存。