BT483细胞系是由E.Y. Lasfargues和W.G. Coutinho于1978年建立的，来源于一名23岁正常月经期且有乳腺癌家族史的女性患者。该患者患有浸润性导管乳腺癌，细胞系是从其肿瘤组织中分离并进行体外培养后生成的。BT483细胞系为乳腺癌的研究提供了重要的模型。

BT483细胞的核型分析显示其模态数为72，范围在46到130之间。被广泛应用于乳腺癌的基础研究以及药物筛选。

BT483细胞特性特征

• 多形性：BT-483细胞具有高度的多形性，表现为细胞核和核仁突出。

• 上皮特征：通过透射电子显微镜观察，BT-483细胞呈现出典型的上皮细胞特征，包括桥粒、微绒毛、紧密连接和间隙连接。

• 致瘤性：BT483细胞在裸鼠身上能够形成肿瘤，显示出其致瘤性。

• BT-483细胞表达多种同工酶：AK-1，1；ES-D，1-2；G6PD，B；GLO-I，2；Me-2，0；PGM1，2；PGM3，2

• BT-483细胞系高度表达孕激素受体，但未检测到α-乳清蛋白的产生。

• 在药物研究中发现，姜黄素对BT483细胞具有时间和剂量依赖性的抗生长作用，同时CDK4和MMP1 mRNA在细胞内的表达降低。

BT483细胞参数表

BT483人乳腺导管癌细胞培养教程

细胞复苏步骤

• 将 BT483细胞 的冻存管从液氮罐中取出，放置于37℃水浴中快速摇晃解冻，大约1-2分钟。

• 解冻后，用70%酒精消毒管外部，避免污染。

• 将解冻的 BT483细胞 悬液转移至离心管，加入5 mL完全培养基。

• 以1000 RPM离心4分钟，弃去上清液，保留沉淀的 BT483细胞。

• 用1-2 mL预热至37℃的完全培养基重悬 BT483细胞。

• 将重悬的 BT483细胞 移至培养瓶或培养皿中，置于培养箱中过夜培养。

细胞传代步骤

• 当 BT483细胞 密度达到80%-90%时，需进行传代操作。使用倒置显微镜检查 BT483细胞 的生长状态。

• 冲洗细胞：弃去旧培养基，用不含钙镁的PBS缓冲液轻轻冲洗 BT483细胞 1-2次。

• 消化细胞：加入0.25%胰蛋白酶-EDTA（0.53 mM EDTA）混合消化液，置于37℃培养箱消化1-2分钟。

• 观察 BT483细胞 逐渐变圆并从瓶壁上脱落。

• 终止消化：加入适量完全培养基终止消化，并轻轻敲击培养瓶，以悬浮 BT483细胞。

• 用6-8 mL完全培养基混匀细胞悬液，在1000 RPM下离心4分钟，弃去上清液。

• 分瓶：将 BT483细胞 悬液按1:2的比例分装至新的培养瓶中，补加8 mL完全培养基，继续培养。

四、细胞冻存步骤

• 冻存液配制：准备90%完全培养基和10%DMSO的混合溶液作为BT483细胞的冻存液。

• 在传代过程中，使用计数板计数 BT483细胞，确保每管冻存的 BT483细胞密度为

• 1×1061×106 cells/mL。将 BT483细胞 与冻存液充分混合。

• 装管与标记：每支冻存管中加入1 mL BT483细胞 悬液，标明细胞系名称、日期及浓度。

• 降温与保存：将冻存管置于程序降温盒中，缓慢降温至-80℃保存24小时，然后转移至液氮罐中长期保存。