HCC70细胞系是在1992年从一位49岁非洲裔美国女性的原发性浸润性导管乳腺癌中分离。该肿瘤被归类为TNM IIIA期，属于三级浸润性导管癌，伴有17个淋巴结中4个转移的特征。建立HCC70细胞系的过程历时44个月。

HCC70细胞系具有上皮细胞特性。尽管HCC70细胞曾被报道为雌激素受体阳性，但一些最新的研究对这一结果提出了相互矛盾的结论，雌激素受体的确切状态仍在进一步评估中。

HCC70细胞特性特征

• HCC70细胞核大、染色质致密、核仁明显

• 电镜下可见大量游离核糖体、粗面内质网、高尔基复合体和少量线粒体

• HCC70是一种三阴性乳腺癌细胞系,即雌激素受体(ER)阴性、孕激素受体(PR)阴性和人表皮生长因子受体2(HER2)阴性

• 对上皮细胞特异性标记物上皮糖蛋白2（EGP2）和细胞角蛋白19呈阳性

• HCC70细胞表现为多倍体，过表达肿瘤抑制基因p53，但不表达Her2/neu癌基因

HCC70细胞参数表

HCC70人乳腺导管癌细胞培养教程

细胞复苏

• 从液氮罐或-80°C冰箱中取出冻存的HCC70细胞管，迅速放入37°C水浴中，轻轻摇晃，直至HCC70细胞完全复苏。

• 使用移液管将复苏后的HCC70细胞悬液转移至含有预热RPMI-1640培养基（含10%胎牛血清FBS和1%青霉素-链霉素）的离心管中，混匀。

• 将HCC70细胞悬液转移至T25培养瓶中，放置于37°C、5% CO₂的培养箱中进行培养。

常规传代

• 当HCC70细胞达到90%汇合时，吸弃培养基，用PBS洗涤细胞两次。

• 加入0.25%胰酶-EDTA溶液，在37°C下消化3-5分钟，直至HCC70细胞变成单个圆形。

• 使用含有血清的培养基终止消化反应，轻轻吹打HCC70细胞以形成单细胞悬液。

• 根据需要，以1:2至1:4的比例将HCC70细胞接种于新的培养瓶中，并加入适量的预温培养基。

• 将培养瓶放入37°C、5% CO₂的培养箱中培养，每2-3天更换一次培养基，直到HCC70细胞再次铺满瓶底。

冻存

• 收集对数生长期的HCC70细胞，离心后弃去上清液。

• 用冻存液（由50%培养基、40%胎牛血清FBS和10%二甲基亚砜DMSO组成）重悬HCC70细胞，将细胞浓度调整至1-2×10^6 cells/ml。

• 将HCC70细胞悬液分装至冻存管中，置于-80°C冰箱中过夜。

• 次日，将冻存管转入液氮罐中保存，以备后续使用。