ZR-75-1细胞（人乳腺癌细胞）

ZR-75-1细胞系是一种上皮细胞系，从一位63岁白人女性的导管癌乳腺组织中分离，常用于癌症研究。

ZR-75-1细胞系具有超三倍体的染色体数量，模式染色体数目为72，在26%的细胞中观察到，具有1.2%的高倍体率。ZR-75-1细胞系含有18个标记染色体，包括t(1q, ?)、M2、M3、del(3)(p21)、der(5)t(5;?)(q35;?)、del(6)(q21)、t(11q14q)和t。其中，M13是成对的。未检测到正常的N14染色体，N6为单拷贝，X染色体为三拷贝，N18为四拷贝。

ZR-75-1细胞特性特征

基因表达：ZR-75-1细胞产生高水平的MUC-1黏蛋白mRNA，低水平的MUC-2 mRNA，但不表达MUC-3基因。
表达标记：表达雌激素受体（ER）。
同工酶：表达葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）和B型同工酶。
致瘤性：ZR-75-1细胞在裸鼠体内能够形成肿瘤。
转移性：ZR-75-1细胞能够在腹水中形成转移

ZR-75-1人乳腺癌细胞参数表

细胞名称	ZR-75-1细胞（人乳腺癌细胞）
细胞别称	ZR751, ZR75-1, ZR75_1
来源	人；63岁女性；乳腺导管癌
生长特性	贴壁生长（不牢固）；上皮细胞样形态
安全等级	1级
培养条件	培养基：RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S；37℃，5% CO₂
生长周期	倍增时间：50-80小时；传代周期：48-60小时
染色体	数目：67-74条（超三倍体）；模式数：72（26%细胞）
特殊染色体	高倍体率：1.2%；18个标记染色体，包括t(1q,?)等
受体表达	雌激素受体（ER）阳性
基因表达	高水平MUC-1 mRNA，低水平MUC-2 mRNA，不表达MUC-3
同工酶	G6PD, B
致瘤性转移	在裸鼠中形成肿瘤；腹水转移
动物实验	植入：SC，高腋；750mm³时间：54.2天；TD：19.8天
激素敏感性	长期缺乏类固醇可能导致雌激素敏感性改变
蛋白表达	GCDFP-15和GCDFP-24表达受雄激素和雌激素拮抗调控
细胞处理	贴壁不牢，到货时飘起正常；静置贴壁后轻柔操作
检测结果	STR鉴定通过；支原体阴性；细菌真菌检测通过
其他检测	内毒素检测通过；复苏存活率>90%
冻存方法	无血清冻存液，液氮储存

培养教程

ZR-75-1人乳腺癌细胞培养教程

复苏操作

从液氮中取出冻存的ZR751细胞，迅速在37°C水浴中融化。
将细胞悬液转移到含预热培养基的离心管中。
低速离心（约1000 rpm，5分钟）去除冻存液。
弃上清，用预热培养基重悬ZR751细胞。
将细胞悬液转移到培养瓶中，轻轻摇匀。

细胞贴壁

初次复苏后，ZR751细胞可能需要较长时间贴壁。
静置培养瓶24-48小时，以便ZR751细胞充分贴壁。
避免在复苏后48小时内频繁操作，以免影响贴壁。

日常培养

换液：每2-3天更换一次培养基。
传代：ZR751细胞汇合度达到80-90%时进行传代，通常以1:2或1:3的比例。

传代操作

用PBS轻柔清洗ZR751细胞1-2次。
加入适量胰蛋白酶-EDTA溶液，37°C孵育2-3分钟。
轻轻拍打培养瓶，观察ZR751细胞是否脱落。
加入含血清的培养基终止消化。
离心收集ZR751细胞，重悬后按比例接种到新的培养瓶中。

注意事项

操作：操作要轻柔，避免剧烈震动导致ZR751细胞脱落。
倍增时间：约为50-80小时，根据实际生长情况调整传代周期。
污染检测：定期进行支原体检测，确保ZR751细胞未被污染。
细胞代次：建议使用低代次（10代以内）的ZR751细胞进行实验。

冻存步骤

使用无血清冻存液。
制备ZR751细胞悬液，密度为1-2×10^6 cells/mL。
将细胞悬液分装到冻存管中。
使用程序降温盒或细胞冻存容器，缓慢降温至-80°C。
24小时后转移到液氮中长期保存。

避免细胞飘起的方法

ZR751细胞在培养过程中容易飘起，可能影响实验结果。以下是一些预防措施：
轻柔操作：在换液和传代过程中轻柔操作，避免剧烈震动。
培养基更换：定期更换培养基，每2-3天换液一次。
使用贴壁促进剂：可使用胶原蛋白、纤连蛋白等贴壁促进剂。
培养瓶选择：使用适合贴壁细胞的培养瓶。

不同温度下的生长特性

标准培养温度：37°C，ZR751细胞生长最佳，倍增时间约为50-80小时。
低温影响：在32°C时，ZR751细胞生长速度减慢，代谢活动降低。
高温影响：在40°C时，ZR751细胞可能受到热应激，导致生长受抑或死亡。
温度稳定性：应保持培养箱内温度稳定，避免频繁开关培养箱门。