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产品名称:skbr3细胞(人乳腺腺癌细胞)
产品详细说明
  • 来源:乳腺;乳房;肋膜渗出液转移灶
  • 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
  • 培养基:McCoy’s 5A+10% FBS+1% P/S
  • 其他:HER2/c-erb-2基因产物过表达,是研究HER2阳性乳腺癌的重要模型

SK-BR-3细胞系于1970年由Trempe G和Old L.J从一名43岁白人a+型女性乳腺癌患者的胸腔积液中分离。该患者曾接受放疗、类固醇、环磷酰胺和5-氟尿嘧啶的治疗。SK-BR-3细胞系过表达HER2/c-erb-2基因产物,是研究HER2阳性乳腺癌的重要模型。

SK-BR-3细胞系是一种具有84条模式染色体的超三倍体人类细胞系,其中34%的细胞具有84条染色体,28%的细胞具有80条染色体,7.3%的细胞具有更高的倍性。skbr3细胞系的染色体组成非常复杂,35%-40%的染色体由结构改变的标记染色体组成。标记物包括 der(1)t(1;21)(p13;q21)、del(2)(q13)和t(7pter-cen--?),这些标记物仅在部分细胞中存在,标记的起源尚不清楚。大多数细胞含有三条正常的X染色体和五条或更多的N7染色体,而正常的N1、N14和N17通常缺失。

skbr3细胞人乳腺腺癌细胞特性特征

  • 分子特征:HER2/c-erb-2基因产物过表达,是研究HER2阳性乳腺癌的重要模型

  • 亚显微结构特征:包括微丝和桥粒、肝糖原颗粒、大溶酶体、成束的细胞质纤丝

  • 致瘤性和转移特征:在裸鼠中可形成分化不良的腺癌;原始转移部位为胸腔积液

  • 抗原表达:A型血;Rh+;HLA A11、Bw22(+/-)、B40、B18

  • 同工酶:AK-1,1-2;ES-D,1;G6PD,B;GLO-I,2;PGM1,1-2;PGM3,1;

skbr3细胞参数表

细胞名称 SK-BR-3 [SKBR3] (人乳腺腺癌细胞)
别称 SK-Br-3; Sk-Br-3; SK BR 03; SKBR-3; SKBr-3; SK-BR3; SKBr3; SkBr3; SKBR3
种属
组织来源 乳腺;乳房;肋膜渗出液转移灶
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 乳腺癌细胞
患者信息 女性;43岁;白种人
建系情况 1970年;由Trempe G和Old L.J建立
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
培养基 McCoy's 5A或RPMI 1640 + 10% FBS + 1% 青霉素/链霉素
培养环境 95%空气 + 5% CO2, 37°C
传代比例 1:2-1:4
换液频率 2-3次/周
倍增时间 ~48-72小时
饱和密度 约1.5 x 10^5 cells/cm²
冻存液 55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO;液氮
分子特征 HER2状态 过表达;ER/PR状态 阴性;p53状态 突变;EGFR状态 表达;E-cadherin 表达
相关基因 ERBB2, GRB7高表达
生物安全 BSL-1
致瘤性 在裸鼠中形成分化不良的腺癌
转移特性 原始转移部位为胸腔积液
抗原表达 血型A; Rh+; HLA A11, Bw22(+/-), B40, B18
亚显微结构 微丝和桥粒、肝糖原颗粒、大溶酶体、成束的细胞质纤丝
表面标志 CK7, CK8/18 表达
同工酶谱 AK-1, 1-2; ES-D, 1; G6PD, B; GLO-I, 2; PGM1, 1-2; PGM3, 1
药物敏感 对靶向HER2的药物(如曲妥珠单抗)敏感
支原体检测 阴性
注意事项 1. 从冷冻状态恢复速度慢,初期附着较轻
2. 培养过程中可能出现漂浮细胞,需要特别处理
3. 倾向于相互堆积,不要让细胞过度生长
4. 患者曾接受过放射、类固醇、环磷酰胺和5-氟尿嘧啶治疗

培养教程

skbr3人乳腺腺癌细胞培养教程

复苏过程

  • SK-BR-3细胞从冷冻状态复苏较慢,初期附着情况较轻。复苏后,保持细胞静置48小时,以便SK-BR-3细胞充分贴壁,不进行任何操作。

  • 如果观察到大量漂浮的SK-BR-3细胞,可以使用台盼蓝检查其活性。

  • 对于活细胞,通过轻柔离心(125xg,5-7分钟)进行收集,然后将细胞悬液放回培养容器中。

日常培养

  • 传代比例: 对于SK-BR-3细胞,推荐使用1:2至1:4的传代比例。

  • 换液频率: 每周2-3次。

  • 倍增时间: SK-BR-3细胞的倍增时间约为48-72小时。

  • 传代时机: 避免SK-BR-3细胞过度生长,建议在细胞汇合度达到70-80%时进行传代。

传代步骤

  • 吸出SK-BR-3细胞的原培养液。

  • 加入2 mL PBS轻轻润洗细胞,吸出废弃液体。

  • 加入1 mL 0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),轻轻晃动培养瓶。

  • 在37°C孵育2-3分钟,待SK-BR-3细胞脱落。

  • 加入等体积的含血清培养基以终止消化。

  • 收集细胞悬液,使用1000 rpm离心5分钟。

  • 弃上清,用新鲜培养基重悬SK-BR-3细胞。

  • 按1:2至1:4的比例将SK-BR-3细胞接种到新培养瓶中。

特殊注意事项

  • 细胞生长: SK-BR-3细胞倾向于相互堆积,避免细胞过度生长,确保培养基和传代操作适时进行。

  • 漂浮细胞: 在培养过程中,SK-BR-3细胞可能会出现漂浮现象。处理方法包括:

  • 使用台盼蓝检查漂浮SK-BR-3细胞的活性。

  • 通过轻柔离心收集漂浮的SK-BR-3细胞,保留它们,避免丢弃。

  • 在换液或传代时,将漂浮细胞与附着细胞一起放回培养容器中。

  • 细胞贴壁: SK-BR-3细胞在复苏后的初期通常以小斑块或细胞群形式附着,漂浮细胞可能较多。给予SK-BR-3细胞充分时间贴壁,避免频繁操作和过度观察。

  • 生长促进: 如果SK-BR-3细胞生长缓慢,可以采用半换液方式促进细胞生长。

冻存条件

  • 冻存液: 55%基础培养基 + 40%胎牛血清(FBS) + 5%二甲基亚硫酰胺(DMSO)。储存温度: 液氮。

复苏和培养中常见问题处理

  • 复苏速度: SK-BR-3细胞从冷冻状态恢复速度较慢,初期附着较轻,可能需要几天时间才完全贴壁。

  • 漂浮细胞: 初期可能会有大量漂浮的SK-BR-3细胞,处理时应通过轻柔离心保留这些细胞,并在后续换液或传代过程中将其放回培养容器中。

STR鉴定及相关

Amelogenin X
CSF1PO 12
D2S1338 20,25
D3S1358 17
D5S818 9 (MSKCC)
9,12 (AddexBio=C0006007/65; ATCC=HTB-30; CCRID; CLS=300333; DSMZ=ACC-736; Technion Genomics Center BCF; KCLB=30030; PubMed=25877200; PubMed=28889351; RCB=RCB2132)
D7S820 9,12
D8S1179 11,12 (CLS=300333)
12 (ATCC=HTB-30; CCRID; DSMZ=ACC-736; Technion Genomics Center BCF; MSKCC; PubMed=25877200)
D13S317 11 (Technion Genomics Center BCF)
11,12 (AddexBio=C0006007/65; ATCC=HTB-30; CCRID; CLS=300333; DSMZ=ACC-736; KCLB=30030; MSKCC; PubMed=25877200; PubMed=28889351; RCB=RCB2132)
D16S539 9
D18S51 10,13
D19S433 14
D21S11 30,30.2
FGA 20
Penta D 9,12
Penta E 10,11
TH01 8,9
TPOX 8,11
vWA 17
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