MCF 10A人乳腺正常上皮细胞系源自1984年从一位白人女性乳腺组织中分离得到。

通过电子显微镜观察，MCF10A细胞株展示出典型的管腔导管细胞形态，MCF10A细胞株还表达通过与MFA-breast和MC-5单克隆抗体的阳性反应检测到的乳腺特异性抗原。

MCF10A细胞株特性

• MCF10A细胞株来源于1984年从一名患有纤维囊性乳房的36岁白人女性的乳腺中分离得到，由密歇根癌症基金会保存。

• MCF 10A细胞系在免疫抑制小鼠非致瘤，在在半固体培养基中致瘤。

• MCF10A细胞株对上皮唾液酸粘蛋白、细胞角蛋白和乳脂肪球抗原呈阳性。

• MCF10A细胞株在胶原中表现出三维生长，并在融合培养物中形成圆顶。

• 对胰岛素、糖皮质激素、霍乱肠毒素和表皮生长因子（EGF）有反应。

• 表达乳腺特异性抗原，如与MFA乳腺和MC-5单克隆抗体的阳性反应。

• 培养基中的钙含量对细胞形态有显著影响。

MCF10A细胞株参数表

MCF10A人正常乳腺上皮细胞培养教程

复苏细胞

• 将含 1mL MCF10A 细胞悬液的冻存管迅速在 37℃ 水浴中解冻，加入 4mL 预热的培养基，并进行适当的离心和混合处理。

• 将所有悬浮细胞转移至 T25 培养瓶中，加入足够的培养基以支持细胞的进一步生长。

细胞传代

• 当 MCF10A 细胞密度达到 80%-90% 时，可进行传代操作。

• 使用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞，加入适量的 0.25% Trypsin 进行消化，并在必要时加入大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。

细胞冻存

• 在细胞生长状态良好的情况下，可进行细胞冻存，以备后续实验使用。

注意事项

• 消化时间长：MCF10A 细胞消化时间较长，通常需5分钟或更久，具体时间受胰酶浓度、效价和消化条件影响。初次消化时需调整最佳消化时间。

• 对培养基要求高：MCF10A 细胞对培养基要求严格，必须含有胰岛素、氢化可的松、表皮生长因子和非必须氨基酸等关键成分，以保证细胞的正常生长和功能。