来源：肺；肺癌患者的胸腔积液
细胞特征：悬浮细胞， 上皮样，悬浮成团
培养基：生长培养基：RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
其他：表达神经元特异性烯醇酶和肌酸激酶的脑同工酶 ；产生大小异常的p53 mRNA (3.7 kb)
NCI-H82人小细胞肺癌细胞系是一种上皮样细胞系，于1978年由A.F. Gazdar及其同事从一名40岁白人男性肺癌患者的胸腔积液中分离；来源于转移部位、胸腔积液。NCI-H82细胞系常用于癌症研究，特别是小细胞肺癌。
NCI-H82细胞系具有接近三倍体的染色体数目，模式染色体数目为58，发生率为44%，多倍体为3%。在核型分析中，可以识别出两个不同的亚群，其中常见的标记染色体有der（1）t（1；709p13；p11）、t（13q；HSR；15q）和der（190t（19；？）（q13.4；？）。一个亚群具有der（3）t（3；20）（p11；p11？）、t（3q19p）、i（7q）和一个来源不明的微小染色体；另一个亚群则有t（1q17p）、del（1）（q21）、der（3）t（3；7）（p12；q11）加上另外两个标记。每个细胞都有两个正常的X染色体拷贝，但未检测到Y染色体。
NCI-H82细胞具备以下特性特征
分子特征
表达特征
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表达v-fes, v-fms, Ha-ras, Ki-ras, N-ras和c-raf 1 mRNA
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表达胰岛素样生长因子II (IGF-II)和心钠素
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L-DOPA脱羧酶或蛙皮素的表达量未达到可检测水平
其他特征
NCI-H82细胞参数表
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细胞名称
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NCI-H82细胞（人小细胞肺癌细胞）
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细胞别称
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NCI-H-82; H82; H-82; NCI H82; NCIH82; H82sclc
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细胞类型
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人小细胞肺癌细胞
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来源
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40岁白人男性肺癌患者的胸腔积液 / 1978年（由A.F.Gazdar及其同事获得）
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形态/生长特性
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上皮样细胞 / 贴壁和悬浮混合生长
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培养基
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RPMI 1640 + 10% FBS+青霉素/链霉素、1%谷氨酰胺、1%丙酮酸钠
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培养条件
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pH 7.2-7.4, 37°C, 5% CO2
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细胞密度
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2x10^6 cells/mL
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染色体数目
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接近三倍体，模式数目为58 ; 多倍体比例3%
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性染色体
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两个正常X染色体，无Y染色体
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标记染色体
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der(1)t(1;7)(p13;p11)、t(13q;HSR;15q)、der(19)t(19;?)(q13.4;?)
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癌基因表达
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myc+, myb-, raf+, ras+, fms+, fes+
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mRNA表达
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v-fes, v-fms, Ha-ras, Ki-ras, N-ras, c-raf 1, p53 mRNA (3.7kb)
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蛋白表达
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神经元特异性烯醇酶, 肌酸激酶脑同工酶, IGF-II, 心钠素
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C-myc
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DNA序列扩增约25倍，RNA增加24倍
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同工酶
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AK-1,1; ES-D,1; G6PD,B; GLO-I,1; Me-2,1; PGM1,1-2; PGM3,1-2
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受体/蛋白
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功能性ANP受体, 神经丝和波形蛋白染色阳性
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未检测到
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L-DOPA脱羧酶, 蛙皮素
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微生物检测
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细菌、真菌、支原体检测均为阴性
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内毒素含量
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≤10 EU/mL
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储存/运输条件
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液氮中长期保存 / 冰袋冷藏运输
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细胞代数
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三代内
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致瘤性
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在裸小鼠身上致瘤
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转移性
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来源于胸腔积液，表明具有转移能力
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培养基储存
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pH 7.2-7.4, 2℃-8℃避光储存
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培养教程
NCI-H82人小细胞肺癌细胞培养教程
NCI-H82细胞解冻步骤
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将冻存的NCI-H82细胞从液氮中取出，迅速放入37°C水浴中解冻。
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解冻后，将NCI-H82细胞悬液转移到含有预热培养基的离心管中。
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以1000rpm离心5分钟，弃去上清。
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用新鲜培养基重悬NCI-H82细胞，转移到培养瓶中。
NCI-H82细胞传代步骤
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当NCI-H82细胞密度达到80-90%时进行传代。
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用PBS轻轻洗涤NCI-H82细胞。
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加入适量胰蛋白酶-EDTA溶液，37°C孵育2-3分钟。
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加入等量含血清的培养基终止消化。
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以1000rpm离心5分钟，弃去上清。
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用新鲜培养基重悬NCI-H82细胞，按1:2或1:3的比例进行传代。
NCI-H82细胞培养注意事项
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操作时保持无菌环境，避免污染。
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培养基含有血清和抗生素，通常无需额外添加。
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避免将培养基长时间放置于室温或高温环境。
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培养基解冻后可能出现少量絮状物，不影响使用。
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所有操作应在有效期内完成。
NCI-H82细胞储存条件
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培养基：2℃-8℃避光储存。
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NCI-H82细胞：液氮中长期保存。
NCI-H82细胞关键培养参数
NCI-H82细胞生长速度和传代频率
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传代频率：当NCI-H82细胞密度达到80-90%时进行传代，通常需要2-3天。
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换液频率：每2-3天更换一次培养基，反映了NCI-H82细胞的生长速度。
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生长特性：NCI-H82细胞为贴壁和悬浮混合生长。
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细胞代数：商业购买的NCI-H82细胞通常在三代内，说明这些细胞可以稳定传代。
STR鉴定及相关
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Amelogenin
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X
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CSF1PO
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11
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D2S1338
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17,24
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D3S1358
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17
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|
D5S818
|
12
|
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D7S820
|
10,13
|
|
D8S1179
|
13
|
|
D13S317
|
8
|
|
D16S539
|
12
|
|
D18S51
|
14,18
|
|
D19S433
|
13
|
|
D21S11
|
28,30
|
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FGA
|
24,25
|
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Penta D
|
10,12
|
|
Penta E
|
11,12
|
|
TH01
|
9,9.3
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|
TPOX
|
11
|
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vWA
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14
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