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产品名称:HCC38细胞(人乳腺导管癌细胞系)
产品详细说明
  • 来源:乳腺
  • 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
  • 培养基:生长培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
  • 其他:HCC38细胞对Her2-neu的表达呈阴性,但对p53的表达呈阳性

HCC38细胞系是从50岁白人女性(患者有平滑肌肉瘤的病史)乳腺导管癌组织中分离,其母亲死于乳腺癌。HCC38细胞系于1992年4月27日启动,历时32个月建立。HCC38细胞肿瘤分类为TMN IIB期,3级,具有3/28淋巴结转移。

HCC38细胞的模态染色体数为75,范围在65至79之间,具有22%的多倍体率。在3p12处存在纯合缺失。在多数中期中检测到至少45条不同的衍生染色体,包括两个大的中心标记,其长度约为正常a组染色体的1.5倍。这些染色体异常包括:del(1)(q24)、del(1)(p22)、del(1)(p13)、add(1)(p12)、del(2)(p16)、add(3)(q10)、del(3)(q13)、del(4)(q13)、del(5)(q23q33)、der(7)(pter’q11)、del(7)(p?)、add(12)(q24)、add(14)(p11)、add(17)(p12)、der(18)、der(X)。HCC38细胞是一个超三倍体的人类细胞系,均匀染色区和双着丝粒染色体被观察到,每对染色体至少有一次重排。QM染色未见正常的X染色体,Y染色体缺失,染色体2、6、11、13、16和20的正常拷贝。

HCC38细胞系特性

  • 上皮细胞特异性标志物: EGP2(上皮糖蛋白2)阳性,CK19阳性

  • 受体表达: 雌激素受体(ER)阴性,孕激素受体(PR)阴性

  • 形态: 上皮细胞样,贴壁生长

  • HCC38细胞对Her2-neu的表达呈阴性,但对p53的表达呈阳性

  • HCC38细胞对上皮细胞特异性标记物上皮糖蛋白2[EGP2]和细胞角蛋白19呈阳性,对雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)的表达呈阴性。

HCC38细胞系参数表

名称 HCC38细胞 (人乳腺导管癌细胞)
别称 Hcc38; HCC-38; HCC 38; HCC0038
来源 1992年从一位50岁白人女性的乳腺导管癌组织中分离建立
建立时间 1992年4月27日启动,历时32个月建立
患者背景 曾有平滑肌肉瘤病史,母亲死于乳腺癌
肿瘤分类 TMN IIB期,3级,3/28淋巴结转移
组织来源 乳腺;乳房/导管
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
生物安全等级 BSL-1
肿瘤类型 乳腺癌细胞
基因表达

癌基因: her2/neu阴性,p53阳性

上皮细胞特异性标志物: EGP2(上皮糖蛋白2)阳性,CK19阳性

受体表达: 雌激素受体(ER)阴性,孕激素受体(PR)阴性

传代比例 1:2-1:4
推荐换液频率 2~3次/周
培养基 RPMI-1640(不含Hepes)+ 10%胎牛血清(FBS)+ 1%双抗(P/S)+ 800ng/ml Taxol(可选)
培养条件 37°C,气相成分为95%空气和5% CO2
冻存条件 基础培养基 + 5% DMSO + 20% FBS,液氮储存
保藏机构 ATCC; CRL-2314

培养教程

HCC38细胞人乳腺导管癌细胞系培养

HCC38细胞复苏

  • 将含有1mL HCC38细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。

  • 在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。

  • 然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。

  • 第二天显微镜下观察HCC38细胞生长情况和细胞密度。

HCC38细胞传代

  • 如果HCC38细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

  • 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

  • 加入0.25%(w/v)胰蛋白酶-0.53mMEDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的HCC38细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。

  • 轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

  • 将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持HCC38细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

HCC38细胞冻存

  • 将待冻存的HCC38细胞用胰蛋白酶消化成单细胞悬液,并以每毫升含100万个细胞的密度重悬在冻存液(90%FBS+10%DMSO)中。

  • 将细胞悬液分装至1.8ml冻存管中,每管0.5-1ml。

  • 将冻存管置于装有酒精的程序降温盒中,于-80℃冰箱中过夜降温。

  • 次日,将冻存管置于液氮中保存。

STR鉴定及相关

Amelogenin X
CSF1PO 12
D1S1656 15,17.3
D2S441 14
D2S1338 17,19
D3S1358 18
D5S818 9
D7S820 10
D8S1179 8,10
D10S1248 13
D12S391 18,18.3
D13S317 12,14
D16S539 10,14
D18S51 15
D19S433 13,15
D21S11 27,28
D22S1045 15
FGA 24
Penta D 9
Penta E 5,11
TH01 9.3
TPOX 9,12
vWA 16,17
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