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产品名称:Du4475细胞(人乳腺上皮细胞)
产品详细说明
  • 来源:乳腺;乳房
  • 细胞特征:悬浮细胞,多细胞聚集, 圆形,上皮细胞样
  • 培养基:生长培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
  • 其他:Du4475细胞表达乳脂肪球成分,呈三阴性

DU4475人乳腺上皮细胞源自一名62岁女性的未分化癌的局部转移性皮肤结节,该患者在乳腺低分化导管癌根治术后7年发展。

DU4475细胞模态数为93,范围在85至95之间。DU4475细胞是非整倍体人类女性细胞,染色体计数在四倍体范围内。正常染色体N16和N21的代表性最低,每个核型没有到两个拷贝,而染色体N7的代表性往往过高,每个核型有四到五个拷贝,但大多数剩余的正常染色体有两到四个拷贝。共发现22条标记染色体,包括iso(1q)、del(1)(q32)、der(1)t(1;?)(p36;?)、del(3)(q24)、der(3)t(3;?)。其中8个与A.J.Langlois等人在报告中描述的内容相同。

Du4475细胞特性

  • Du4475细胞表达乳脂肪球成分,呈三阴性。

  • Du4475细胞为非整倍体,染色体计数在四倍体范围内,常见染色体N16和N21的拷贝数低于两个,而染色体N7的拷贝数高达四到五个。

  • 发现22条标记染色体,包括iso(1q)、del(1)(q32)、der(1)t(1;?)(p36;?)、del(3)(q24)、der 3)t(3;?)等。

  • Du4475细胞是致瘤的,在裸鼠体内具有转移能力。

  • 透射电镜观察显示细胞具有大量桥粒和叉指微绒毛。

  • Du4475细胞生长形态为漂浮的簇,不能通过染料排除测试来准确测定生存能力。

  • Du4475细胞形成的肿瘤组织学上与原发癌相似。

  • 同工酶:AK-1,1;S-D,1;G6PD,B;GLO-I,2;Me-2,2;PGM1, 1-2;PGM3,1

Du4475细胞参数表

细胞名称 DU4475细胞 (人乳腺上皮细胞)
别称 Du4475; DU-4475; Du-4475; DU 4475; Du 4475; Duke University 4475
种属
组织来源 乳腺;乳房
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 乳腺癌细胞
供体信息 女性,62岁
来源描述

从一名62岁女性的未分化癌的局部转移性皮肤结节建立,该患者在乳腺低分化导管癌根治术

后7年发展。文献中描述了细胞在无胸腺裸鼠中容易生长,并产生肿瘤。

生长特性 悬浮细胞,多细胞聚集
细胞形态 圆形,上皮细胞样
培养环境 空气,95%;CO₂,5%;37℃
完全培养基 RPMI-1640 (PM150110) + 10% FBS (164210-50) + 1% P/S (PB180120)
冻存条件 55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO,液氮保存
传代比例 1:2-1:3
换液频次 2-3次/周
倍增时间 80-100小时
生物安全等级 1
致瘤性 是,在裸鼠中致瘤
同工酶 AK-1, 1; S-D, 1; G6PD, B; GLO-I, 2; Me-2, 2; PGM1, 1-2; PGM3, 1
细胞模态数 93;范围85至95
染色体特性

非整倍体,染色体计数在四倍体范围内,常见染色体N16和N21的拷贝数低于两个,

而染色体N7的拷贝数高达四到五个。

标记染色体

22条,包括iso(1q)、del(1)(q32)、der(1)t(1;?)(p36;?)

、del(3)(q24)、der(3)t(3;?)等。

电镜观察特征 透射电镜观察到大量桥粒和叉指微绒毛。
生长形态 漂浮的簇,不能通过染料排除测试来准确测定生存能力。
肿瘤组织学特征 形成的肿瘤其组织学与原发癌相似。
保藏机构 ATCC; HTB-123
备注 该细胞为悬浮细胞,请注意离心收集细胞悬液,请勿直接倒掉细胞培养液。

培养教程

Du4475人乳腺上皮细胞培养

细胞复苏步骤

  • 解冻: 收到细胞后应尽快进行复苏。如果需要继续储存Du4475细胞,应存放在液氮蒸汽相中,而不是-70°C。储存在-70°C会导致细胞活性下降。将冻存管在37°C的水浴中轻轻摇动解冻。为减少污染的可能性,请保持O形圈和盖子不接触水。解冻应迅速(约2分钟)。

  • 消毒: 一旦细胞解冻,将冻存管从水浴中取出,并通过浸入或喷洒70%乙醇进行消毒。从此时起的所有操作应在严格的无菌条件下进行。

  • 离心: 将冻存管内容物转移到含有9.0 mL完全培养基的离心管中,以约125 x g离心5至7分钟。

  • 重悬细胞: 用推荐的完全培养基重悬细胞沉淀(见具体批次信息以获取推荐的培养稀释比例),并分装到25 cm²或75 cm²的培养瓶中。在细胞恢复期间,避免培养基过度碱性。建议在加入冻存管内容物之前,将含有完全培养基的培养容器置于培养箱中至少15分钟,以使培养基达到正常pH值(7.0至7.6)。

  • 培养: 在37°C适宜的培养箱中培养。推荐使用5% CO₂的空气环境进行培养。

传代步骤

  • 维持培养: 可以通过补充新鲜培养基或更换培养基来维持Du4475细胞培养。新培养物应以2 x 10⁵细胞/mL建立,并维持在10⁵至10⁶细胞/mL之间。

  • 培养基更换: 每周更换2至3次培养基。

STR鉴定及相关

Amelogenin X
CSF1PO 9,12
D2S1338 20,25
D3S1358 14,16
D5S818 6,11 (DSMZ=ACC-427)
11 (ATCC=HTB-123; CCRID=1101HUM-PUMC000342; CLS=300371; Cosmic-CLP=906844; PubMed=25877200)
D6S1043 11
D7S820 9,10
D8S1179 10,13
D12S391 18.3,25
D13S317 11,14
D16S539 11,12
D18S51 14,16
D19S433 14
D21S11 29,31.2
FGA 22,25
Penta D 13,14
Penta E 7,13
TH01 6,8
TPOX 8
vWA 17
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