BT-549细胞是从一名72岁的白人女性乳腺导管癌患者的乳头状浸润性导管肿瘤中分离出的上皮细胞系，建系于1978年。BT-549细胞源自具有局部淋巴结转移的肿瘤组织。BT-549细胞形态包括上皮细胞样成分和多核巨细胞，能够分泌粘蛋白样物质。

BT-549细胞属于非整倍体，染色体计数在超三倍体范围内，X染色体存在异常。正常染色体N10和N13明显代表性不足，染色体N2、N12和N17也倾向于代表性不足。相对于其他正常染色体的拷贝数，染色体N8的代表性过高，染色体N5和N18的拷贝数通常也比大多数染色体多。标记染色体包括iso（13q）、10q+、del（X）（q22:）和del（11）（p11:）。

BT-549细胞特性

• bt549细胞来源于1978年，源自一名72岁的白人女性乳腺导管癌患者。

• bt549细胞来源组织为乳头状浸润性导管肿瘤，且已发现部分局部淋巴结转移。

• bt549细胞形态包括上皮细胞样成分和多核巨细胞。

• bt549细胞具有分泌粘蛋白样物质的能力。

• bt549细胞属于非整倍体，染色体计数在超三倍体范围内，X染色体存在异常。

• 检测到4条标记染色体：iso（13q），10q+，del（X）（q22:），del（11）（p11:）。

• 生长特性为贴壁生长。

BT-549细胞参数表

BT549乳腺癌细胞培养

复苏细胞

• 将含有1mL BT-549细胞悬液的冻存管在37°C水浴中快速解冻，并加入5mL预热的培养基（如RPMI-1640 + 10% FBS）混合均匀。

• 在1000 RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL新鲜预热的培养基后吹匀。

• 将所有BT-549细胞悬液转移到预热的培养瓶或培养皿中，过夜培养在37°C、5% CO2的培养箱中。

细胞传代

• 当BT-549细胞密度达到80%-90%时，进行传代。

• 弃去培养上清，用不含钙和镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

• 加入1-2mL消化液（0.25% Trypsin-0.53mM EDTA），置于37°C培养箱中消化1-2分钟，直至绝大多数细胞脱落。

• 在显微镜下观察细胞消化情况，迅速加入等量含10% FBS的培养基终止消化。

• 轻轻吹打BT-549细胞悬液，将细胞悬液收集至无菌离心管中，在1000 RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液。

• 补加1-2mL预热的培养基后吹匀，按照1:2到1:5的比例将BT-549细胞悬液分装到新的预热培养瓶或培养皿中。

细胞冻存

• 当BT-549细胞生长状态良好时，可进行冻存。

• 弃去培养基后加入适量胰酶，细胞变圆脱落后，进行离心收集。

• 在1000 RPM条件下离心8-10分钟，去除上清液，按照90% FBS + 10% DMSO的比例加入冻存液。

• 将BT-549细胞冻存管密封并放置于液氮中保存。

注意事项

• 建议定期检查BT-549细胞的健康状况和消除可能的污染。

• 保持BT-549细胞培养的环境稳定，如温度、CO2浓度和培养基配方。

• 注意传代过程中的无菌操作，以确保BT-549细胞培养的纯度和健康状态。