MCF7 人乳腺癌细胞

MCF-7细胞是一种源自1970年、来自密歇根州安阿伯市的乳腺癌患者的胸腔穿刺活检样本的细胞系，由美国密歇根大学医学中心的Herbert Soule博士及其同事分离和培养。这种细胞对雌激素敏感，被用于乳腺癌研究和3D细胞培养。

MCF-7细胞的染色体模态数在82，具有一定的范围，而干系染色体数目呈变异，从超三倍性到低倍性不等。每个S中期都可见到29至34条标记染色体，其中24-28个标记物在至少30%的细胞中可见。该细胞系通常显示出一个大的亚中心（M1）和3个大的近中心（M2、M3和M4）标记物。未检测到DM，20号染色体为无主体，X染色体为二体。

MCF-7细胞表达O型血和Rh+，以及胰岛素样生长因子结合蛋白（IGFBP）BP-2、BP-4、BP-5等基因、还表达雌激素受体，并具有AK-1、ES-D、G6PD、GLO-I、PGM1、PGM3等同工酶。

MCF7细胞系保留了分化的乳腺上皮的几个特征，包括通过细胞质雌激素受体处理雌二醇的能力和形成圆顶的能力。这些细胞表达WNT7B癌基因。MCF7细胞的生长受到肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的抑制。IGFBP的分泌可以通过抗雌激素治疗来调节。

细胞特征：

MCF-7细胞具有乳腺上皮细胞的特征，呈现出极性生长和表达乳腺特异性标志物的特点。
这些细胞表达雌激素受体（ER+），因此对雌激素敏感，可用于研究雌激素在乳腺癌发生和发展中的作用。

MCF7 人乳腺癌细胞产品参数表

细胞名称	MCF-7(人乳腺癌细胞)
细胞别称	MCF 7; MCF.7; MCF7; Michigan Cancer Foundation-7; ssMCF-7; ssMCF7; MCF7/WT; MCF7-CTRL; IBMF-7
来源	乳腺，乳房；源自转移部位：胸腔积液；女性；69岁
细胞形态	上皮细胞样
细胞类型	肿瘤细胞
生长特性	贴壁细胞
生长条件	生长培养基: MEM＋10μg/mL Insulin＋10% FBS＋1% P/S；气相：95%空气， 5% CO2，温度：37℃
冻存条件	冻存液：基础培养基+40% FBS+5% DMSO，液氮保存
细胞模态数	82 (范围: 66至87)
染色体数目	干系染色体数目从超三倍性到低倍性不等，2S组分出现在1%
中期染色体数目	每个S中期有29至34条标记染色体
标记物出现频率	24-28个标记物出现在至少30%的细胞中
基因表达	胰岛素样生长因子结合蛋白（IGFBP）BP-2、BP-4、BP-5；雌激素受体；同工酶； AK-1，1；ES-D，1-2；G6PD，B；GLO-I，1-2；PGM1, 1-2；PGM3，1
传代比例	推荐1:2-1:4
换液频率	推荐2-3次/周
典型标志物	ER、PR、HER2
生长受影响	肿瘤坏死因子α（TNF alpha）可以抑制生长；抗雌激素处理细胞能调变IGFBP’S的分泌
生长周期	30-72小时
抗原表达	O型血；Rh+
WNT7B表达	是的，表达WNT7B癌基因
IGFBP分泌	可以通过抗雌激素治疗来调节
染色体特征	未检测到DM；20号染色体为无主体，X染色体为二体

培养教程

MCF-7细胞培养条件

参数	描述
培养基	89% MEM + 10% FBS + 1% PS + 0.01mg/ml insulin
气相条件	95% 空气 + 5% 二氧化碳
温度	37℃
湿度	70%-80%

MCF-7细胞培养注意事项

必须添加胰岛素：胰岛素是细胞培养基中的重要添加物质，对糖和氨基酸转运、合成代谢、细胞生长等起重要作用。
细胞贴壁较慢，处理后最好48小时后再观察。MCF-7细胞刚复苏时生长较慢，贴壁细胞需观察舒展并开始分裂。
MCF-7细胞生长不均匀，需要充分散。
细胞成团簇生长，最终形成单层，生长速度缓慢。
传代比例一般为1:2至1:4，每周传代2-3次。
MCF-7细胞贴壁率低，漂浮细胞是正常现象，需要等待3天才能完全贴壁。
细胞密度低时生长缓慢，建议启动接种密度为8.0 x 10^4至1.5 x 10^5 活细胞/cm^2。

MCF-7细胞培养实验准备

提前开启紫外照射30分钟消毒灭菌，工作台开灯通风10分钟，用75%酒精擦拭台面。

MCF-7细胞培养操作

复苏步骤：

在37℃水浴中迅速摇晃解冻含有MCF-7细胞悬液的冻存管，加入4-9 mL培养基混合均匀。
离心5分钟，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。
加入含适量培养基的培养瓶或皿中培养过夜，第三天换液并检查细胞密度。

传代处理：

弃去培养上清，用PBS润洗细胞1-2次。
加入消化液（0.25% Trypsin-0.02% EDTA），消化1-3分钟，观察细胞消化情况，迅速终止消化。
分到新培养基的培养皿或瓶中，置于培养箱中培养。

MCF-7细胞冻存操作

细胞生长状态良好时，收集细胞及培养液，冻存液调整至1×10^6~3×10^6/mL，冻存管冻存，液氮储存。