12Z细胞系是一种源自37岁女性患者子宫内膜组织的永生化人子宫内膜异位症细胞系。在患者腹腔镜手术中提取了子宫内膜样组织，随后通过SV40病毒转染使细胞获得永生化特性，能够在体外条件下无限增殖。12Z细胞属于转化的上皮样细胞，是研究子宫内膜异位症病理机制的重要模型。12Z细胞广泛用于与子宫内膜异位症相关的基因功能研究、疾病标志物的鉴定以及潜在治疗靶点的探索，具有重要的科研价值。

12z细胞特性特征

• 基因表达：12Z细胞系表达多种与子宫内膜异位症相关的基因和标志物，包括雌激素受体α和β、孕激素受体、N-钙粘蛋白等。

• 细胞标志物：12Z细胞表现出体内可见的子宫内膜异位症病变标志物的表达，包括SV40T抗原和其他上皮细胞特征。

12z永生化人子宫内膜异位症细胞参数表

12z细胞（永生化人子宫内膜异位症细胞）培养教程

12Z细胞解冻

• 准备预热至37°C的完全培养基（如DMEM/F12）以及T25培养瓶。

• 使用37°C水浴快速解冻12Z细胞冻存管，避免细胞长时间暴露在非理想环境中。

• 将冻存的12Z细胞冻存管从液氮中取出，迅速放入37°C水浴中，轻轻摇晃，直至细胞完全解冻（约1-2分钟）。

• 将解冻后的细胞悬液转移到盛有9 mL预热培养基的离心管中，以125 × g离心7分钟，去除冷冻保护剂。

• 弃去上清液，将细胞重悬于5 mL完全培养基中，转移至T25培养瓶，放置于37°C、5% CO₂培养箱中培养。

• 每天通过显微镜观察12Z细胞的形态、贴壁及汇合情况，确保其逐步恢复到健康状态。

12Z细胞培养

• 采用DMEM/F12培养基，加入10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素-链霉素（P/S）。

• 在37°C、5% CO₂的恒温培养箱中培养12Z细胞。

• 每2-3天更换一次培养基，去除代谢废物并补充营养，保持12Z细胞的生长状态。

12Z细胞传代

• 当12Z细胞汇合度达到80%-90%时进行传代操作。

• 去除旧的培养基，用无钙镁PBS缓冲液洗涤12Z细胞，去除残余血清。

• 添加2-4 mL胰蛋白酶-EDTA溶液，置于37°C培养箱中消化2-5分钟。

• 观察细胞间隙变大时，终止消化，加入完全培养基中和胰蛋白酶。

• 轻轻吹打瓶壁使12Z细胞脱落，制成细胞悬液。

• 使用血球计数板计数细胞后，根据1:3至1:5的比例将细胞接种至新培养瓶中。

12Z细胞冻存

• 配制含5% DMSO和95%完全培养基的冷冻保存液，确保细胞在低温下的存活率。

• 收集对数生长期的12Z细胞，以125 × g离心7分钟，弃去上清液。

• 将细胞重悬于冷冻培养基中，调整细胞浓度为2-5 × 10⁶个/mL。

• 分装1 mL细胞悬液至冻存管，逐步降温（如使用程序降温盒）后，存放于-80°C过夜，最终转移至液氮中长期保存。

注意事项

• 无菌操作：操作过程中全程保持无菌环境，避免12Z细胞污染。

• 记录观察：定期记录12Z细胞的形态、贴壁状态及生长速率。

• 培养基质量：确保使用优质胎牛血清和培养基，以提供充足营养。