KLE人子宫内膜癌细胞系是从一名64岁白人女性的子宫内膜腺癌组织中分离，最早由G·R·Richardson于1984年建立。KLE细胞系表现为上皮样形态，具有贴壁生长的特性，并且在染色体数目上表现出非整倍体的特征，染色体数量范围在51到66之间。

KLE细胞特性特征

• 微绒毛：在电子显微镜下观察，KLE细胞表面具有微绒毛，显示出与正常子宫内膜相似的结构。

• 致瘤性：在裸鼠中接种107个细胞后，肿瘤在21天内以100%的频率（5/5）发展，显示出强烈的致瘤能力。

• 细胞间连接：肿瘤细胞间紧密相连，形成特定的连接复合体，类似于孕激素刺激下的正常子宫内膜。肿瘤不形成腺体。

• 血型：KLE细胞表达O型血抗原，Rh+，这可能影响其在体内的免疫反应

KLE细胞参数表

细胞名称	KLE细胞系（人子宫内膜癌细胞系）
细胞类型	人子宫内膜癌细胞
组织来源	子宫内膜
患者信息	64岁白人女性
细胞形态	贴壁生长；上皮细胞样
染色体特征	非整倍体，染色体数量范围51-66
致瘤性	在裸鼠中接种107个细胞后，肿瘤在21天内100%发展
抗原表达	O型血，Rh+
培养基	DMEM/F12 + 10% FBS + 1% P/S
培养气相	95%空气 + 5% CO2；37°C
传代比例	1:2 到 1:5
细胞密度	约5×10^5 cells/mL
支原体检测	阴性
内毒素含量	≤3 EU/mL
储存条件	液氮或-80°C冰箱
复苏后存活率	良好
细胞生长状态	良好，形态正常
冻存方式	液氮冻存
质量保证	细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，保证5代以内

KLE人子宫内膜癌细胞培养教程

细胞复苏

• 从液氮中取出冻存的KLE细胞，迅速置于37°C水浴中解冻，时间控制在1-2分钟内。

• 解冻后，立即将KLE细胞转移至含有10% FBS的DMEM/F12培养基中，轻轻混匀以避免KLE细胞损伤。

• 将KLE细胞悬液离心（1000 rpm，5分钟），去除上清液。

细胞接种

• 将KLE细胞重悬于适量的新鲜培养基中（如5-10 mL），然后转移至已准备好的细胞培养瓶中。

• 轻轻摇晃培养瓶，使KLE细胞均匀分布在瓶底。

培养监测

• 每天检查KLE细胞的生长情况，特别注意是否存在污染。

• KLE细胞通常在2-3天内贴壁并开始增殖，确保培养条件稳定。

细胞传代

• 当KLE细胞达到70%-80%汇合度时，开始传代操作。

• 去除培养基，用无菌PBS缓冲液洗涤KLE细胞，清除残余的培养基。

• 加入适量的胰酶溶液（1-2 mL），确保KLE细胞完全浸泡，轻轻摇晃。

• 将培养瓶置于37°C培养箱中，观察KLE细胞是否脱落，通常需要1-5分钟。

• KLE细胞脱落后，加入新鲜培养基中和胰酶，终止胰酶反应，轻轻吹打KLE细胞悬液。

• KLE细胞悬液离心（1000 rpm，5分钟），去除上清液，将KLE细胞重悬于新鲜培养基中，接种至新的培养瓶中。

细胞储存

• 若需长期保存KLE细胞，使用含10% DMSO的冻存培养基，将KLE细胞分装于冻存管中。

• 将冻存管放入-80°C冰箱中保存，或逐步冷却至液氮中以长期保存KLE细胞。

注意事项

• 无菌操作：在整个KLE细胞培养过程中，严格保持无菌操作，防止污染。

• 培养基更换：每2-3天更换培养基，保持KLE细胞的最佳生长环境。

• 细胞密度管理：避免KLE细胞过度生长，定期传代以维持KLE细胞的活力。

• 运输条件：KLE细胞运输时需冷藏于2℃-8℃，使用干冰或冰袋确保温度控制。