RL95-2细胞是一种上皮样人子宫内膜癌细胞，来源于一名65岁白人女性患者的子宫内膜腺癌组织，由DL Way于1983年建立。rl95-2细胞常用于癌症研究，具有特征性结构，包括α角蛋白、明确的连接复合体、张力丝和表面微绒毛。rl95-2细胞表达雌激素受体，是阳性标记的细胞系。

rl95-2细胞特性特征

• 分子特征：表达α角蛋白；细胞表面具有微绒毛；具有明确的连接复合体和张力丝；

• 表达特征：雌激素受体阳性（estrogen receptor positive）

• 生长特性：贴壁生长；极容易形成细胞团，不易消化成单个细胞；贴壁速度较慢；倾向于团状生长，不会完全覆盖培养皿

rl95-2细胞参数表

细胞名称	RL95-2人子宫内膜癌细胞 (Human Endometrial Cancer Cells)
别称	RL-95-2; RL-952; RL952; RL95
来源	人源；65岁女性；子宫内膜腺癌
建立信息	1983年由DL Way建立；细胞代数10代以内
形态特征	上皮细胞样；贴壁生长
培养基	89% DMEM/F-12 + 10% FBS + 0.005mg/ml 胰岛素 + 1%双抗
培养环境	37℃；95%空气 + 5%CO2；湿度70-80%
传代信息	比例1:2至1:4；每周2-3次；密度达80%以上
生长参数	倍增时间约22小时；贴壁较慢；易抱团生长
特殊现象	培养中可能有少量漂浮细胞；不易消化成单个细胞
表达特征	雌激素受体阳性；表达α角蛋白；具微绒毛
结构特征	具有连接复合体和张力丝
安全等级	生物安全等级1级
规格与检测	1×10^6 cells/T25瓶或1mL管；支原体阴性；STR已鉴定
保藏信息	ATCC (CRL-1671)；中科院分子细胞科学中心
限制与特性	仅用于科研；易成团；不易消化成单细胞
运输方式	T25瓶（常温）或冻存管（干冰）
收货处理	T25瓶：37℃培养2-4h；冻存管：液氮或直接复苏
保存条件	T25瓶：37℃培养箱；冻存管：液氮
供应与处理	现货1周左右；收货后按规定处理
传代建议	首次1:2；密度80%-90%可传代
冻存方法	90%血清+10% DMSO；现配；梯度降温；液氮储存

rl95-2人子宫内膜癌细胞系培养教程

冻存RL95-2细胞的复苏

• 在37℃水浴中快速解冻RL95-2细胞冻存管，约1-2分钟。

• 使用75%酒精消毒管壁后，在无菌操作台内操作RL95-2细胞。

• 将RL95-2细胞悬液转入含有9mL完全培养基的15mL离心管，1000rpm离心5分钟。

• 弃去上清，用新鲜培养基重悬RL95-2细胞，转移到T25培养瓶。

• 将RL95-2细胞置于37℃、5% CO2培养箱中培养。

RL95-2细胞接收后的处理

• 收到RL95-2细胞的T25瓶后，用75%酒精消毒瓶壁，并放入37℃培养箱2-3小时。

• 显微镜下检查RL95-2细胞状态，确保无污染且RL95-2细胞状态良好。

• 如果RL95-2细胞密度低于60%，弃去旧培养基，加入6-8mL新鲜培养基继续培养。

• 当RL95-2细胞密度达70%-80%以上时，可进行传代。

RL95-2细胞传代操作

传代比例：首次传代比例建议为1:2，即一个T25瓶RL95-2细胞分为两个T25瓶或两个6cm培养皿。

• 弃去RL95-2细胞的旧培养基，用PBS轻轻冲洗细胞。

• 加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃孵育2-5分钟，观察RL95-2细胞开始脱落。

• 加入完全培养基终止消化，轻轻吹打RL95-2细胞使其脱离瓶壁。

• 将RL95-2细胞悬液转移到离心管中，1000rpm离心5分钟。

• 弃去上清，加入新鲜培养基重悬RL95-2细胞，并按1:2比例分装到新T25瓶中。

• 放入培养箱中继续培养RL95-2细胞。

RL95-2细胞冻存操作

• 当RL95-2细胞密度达80%-90%时，弃去培养基，用PBS冲洗。

• 加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液消化RL95-2细胞，终止消化后离心收集细胞。

• 重悬于冻存液（90% FBS + 10% DMSO）中，分装到RL95-2细胞冻存管。

• 逐步降温：先放置于-80℃过夜，然后转入液氮中长期保存RL95-2细胞。

RL95-2细胞注意事项

• 运输用培养基：运输过程中使用的RL95-2细胞培养基不能再用于培养，请换用新配制的完全培养基。

• 细胞状态观察：每次传代前后都要显微镜下观察RL95-2细胞状态，确保健康无污染。

• 贴壁细胞：RL95-2细胞贴壁较慢，消化处理后24小时内尽量不要移动培养瓶，以免影响贴壁。

• 特殊现象：RL95-2细胞培养过程中可能有少量细胞漂浮，属于正常现象。

RL95-2细胞优化措施

• 消化时间控制：严格控制RL95-2细胞消化时间（2-5分钟），密切观察细胞脱落情况，及时终止消化。

• 轻柔操作：消化后使用含血清的培养基轻轻吹打RL95-2细胞，避免过度用力。

• 过滤处理：若RL95-2细胞悬液中有明显细胞团，使用40μm或70μm的细胞筛网过滤。

• 降低接种密度：初次传代建议1:2比例，避免RL95-2细胞接种密度过高。

• 培养基调整：可增加血清浓度至15-20%以促进RL95-2细胞贴壁。

• 静置培养：接种后24小时内不要移动培养瓶，确保RL95-2细胞充分贴壁。

• 及时换液：首次接种后48-72小时更换培养基，以去除未贴壁RL95-2细胞。

• 定期观察：每日观察RL95-2细胞生长状态，及时处理细胞团。

• 提前传代：当RL95-2细胞密度达70-80%时进行传代，防止过度生长。