HT-3细胞是一种上皮样细胞，是从一名58岁的白人女性宫颈癌患者的淋巴结中分离。

HT-3细胞属于亚三倍体至超三倍体范围（+A，+B，+C，+D，+F，-E），其模态数在65至66之间。HT3细胞系中存在双心核、端心核碎片、分钟、易位、环、二次收缩、断裂、粉碎以及大的近心核和大的近中心核标记等异常结构。

HT3细胞系特性

• HT-3 细胞HT-3细胞是上皮样细胞，可用于癌症研究

• HT-3 细胞的超微结构特点包括大量微绒毛、突出的核仁、稀疏的粗面内质网（RER）以及发育良好的高尔基体

• HT-3 细胞表达视网膜母细胞瘤蛋白（pRB），但大小异常；P53 表达升高，存在密码子245处的点突变（Gly -> Val）

• HT-3 细胞检测：人乳头瘤病毒 DNA 和 RNA 均为阴性、未观察到病毒颗粒

• HT-3 细胞在裸鼠体内形成低分化表皮样癌（III级）、在类固醇治疗的仓鼠中也能形成肿瘤

• 肿瘤基因：p53+，pRB+

• 基因表达：血型A，Rh+

• 同工酶包括 AK-1，1；ES-D，1；G6PD，B；GLO-I，1-2；Me-2，1；PGM1，1；PGM3，1

• HT-3 细胞在1965年发现并消除了支原体污染

HT3细胞系参数表

HT3人子宫颈癌细胞系培养教程

培养前准备

• 用75%酒精喷洒整个HT-3 细胞培养瓶消毒

• 将HT-3 细胞培养瓶平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲

• 置于无菌操作台，打开HT-3 细胞培养瓶瓶口，将其中的培养液去掉

• 加入5-6mL新鲜培养基（以T25培养瓶为例），置于细胞培养箱中培养

• 根据HT-3 细胞生长状况及培养基颜色变化进行换液及传代，一般2到3天换一次液

HT-3细胞传代

• 当HT-3 细胞长满瓶底面积80%-90%时，进行传代。传代比例为1:3到1:8。

• 将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37℃预热

• 倒掉HT-3 细胞培养瓶中的培养基，加入3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去

• 加入1-2 ml预热好的胰酶，置于37℃孵育消化

• 显微镜下观察消化情况，HT-3 细胞触角回收变圆且轻拍瓶壁见HT-3 细胞脱落为最佳消化时间，记录最佳消化时间以便下次消化

• 消化好后加入3ml完全培养基终止消化

• 用移液枪轻轻吹打瓶壁上的HT-3 细胞，使之完全脱落，收集HT-3 细胞悬液

• 1200rpm离心3分钟，弃上清，加入完全培养基重悬HT-3 细胞，进行传代

HT-3细胞冻存细胞的复苏

• 将含有1mL HT-3 细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻

• 加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀

• 在1000RPM条件下离心3-5分钟，弃去上清液，用完全培养基重悬HT-3 细胞

• 将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中，37℃培养过夜

• 第二天显微镜下观察HT-3 细胞生长情况和细胞密度