海拉细胞(HeLa Cells)是从一个31岁的黑人女性患者的宫颈癌组织中分离和培养出来的,该患者于1941年在约翰·霍普金斯医院被诊断出患有宫颈癌,并接受了治疗。治疗过程中,医生从她的宫颈癌组织中取了一个样本,这个样本最终成为了海拉细胞系的来源。
这个样本最初被带到科学家的实验室进行研究。与其他细胞不同,海拉细胞不仅成功地存活了下来,而且在继续培养中迅速繁殖。海拉细胞的独特特性被认为是一种突破,因为以前的细胞培养通常都会很快衰老并最终死亡,而海拉细胞却能够无限增殖,成为了第一个成功维持的人类细胞系。
尽管该患者本人并不知道她的细胞被用于科学研究,也没有为此给予任何授权,但她的细胞却成为了医学和科学研究中最重要的工具之一。海拉细胞系被广泛应用于癌症、病毒学、基因工程、药物研发等领域。虽然该患者早已去世,但她的细胞至今仍在全球范围内被广泛使用,并为无数科学研究做出了重要贡献。
Hela细胞模态数为82,范围在70到164之间,98%的细胞中有一条小的末端着丝粒染色体。1385个细胞检测到100%的非整倍体。文献报道了四种典型的HeLa标记染色体。其中,M1拷贝为1号染色体和3号染色体长臂的重排长臂和着丝粒;M2拷贝为3号染色体的短臂和5号染色体的长臂的组合;M3拷贝为5号染色体短臂的一个等染色体;M4拷贝由11号染色体的长臂和19号染色体的一个臂组成。
基因表达方面,海拉细胞呈现出免疫过氧化物酶染色角蛋白阳性,溶血磷脂酰胆碱(lyso-PC)可诱导AP-1活性,以及c-jun N-末端激酶活性(JNK1)。同工酶G6PD也存在于海拉细胞中。报道显示,HeLa细胞含有人乳头状瘤病毒18(HPV-18)序列,p53表达较低,而pRB(视网膜母细胞瘤抑制因子)水平正常。
HELA细胞系培养操作指南
1.实验室准备
确保实验室操作区域符合无菌条件。
准备所需的培养皿、移液器、无菌培养瓶等器材。
准备所需的DMEM培养基、20%胎牛血清、抗生素等试剂。
2. 培养步骤
2.1. 预备工作
预热HELA细胞所需的培养皿或培养瓶至37°C,确保表面干净无细胞残留。
2.2. 细胞培养
向培养皿中加入足够的DMEM培养基,使底部完全覆盖。
添加20%胎牛血清,提供HELA细胞所需的生长因子和营养物质。
加入适量的抗生素以防止细菌和真菌污染。
将培养皿置于37°C恒温培养箱中。
2.3. 细胞分裂
当HELA细胞密度达到80%-90%时,进行细胞分裂。
使用适当的细胞解离液将HELA细胞从培养皿中解离。
将解离后的HELA细胞转移至新的培养皿中,并添加适量的培养基。
2.4. 注意事项
严格遵守无菌操作程序,确保HELA细胞培养的纯度和可靠性。
避免HELA细胞污染或外界物质的污染,以免影响实验结果。
定期观察HELA细胞的生长状态和形态学特征,及时处理细胞的异常变化。
3. 复苏和冻存
复苏:将冻存的HELA细胞融化后转移到新的培养皿中进行培养。
冻存:将HELA细胞悬液与冻存液混合后分装入冻存管,存放于液氮中。
4. 细胞检测和应用
定期检测HELA细胞的纯度、活性和双向污染。
在癌症、病毒学、基因工程、药物研发等领域应用HELA细胞系进行相关实验研究。