COV434细胞系源自一名27岁女性患有转移性颗粒细胞癌患者的卵巢肿瘤。然而，后续研究表明，COV434细胞系可能实际来源于高钙血症型卵巢小细胞癌。
COV434细胞系的建立来自于患者的实体原发性肿瘤。COV434细胞系保留了许多天然颗粒细胞的特征和功能，包括二倍体、小卵泡样聚集体的生长特性，以及与天然卵丘细胞共培养时形成的细胞间缝隙连接。

COV434细胞特性特征

• COV434细胞表达完整的FSH受体、缺乏LH受体、表达特定的凋亡分子标志物、表达TLR（toll样受体）

• COV434细胞能分泌17β-雌二醇，并在FSH刺激下增加分泌、对FSH刺激有增殖反应、无黄体生成能力、保留了天然颗粒细胞的许多特征

• 可能携带p53基因的R248Q热点突变

COV434细胞应用研究

• 17β-雌二醇对颗粒细胞瘤生长、迁移和侵袭的影响

• 如果突变型p53（失活R248Q热点突变）作为癌症特异性药物靶点发挥作用

• TLR（toll样受体）在细胞系中的表达及其功能

COV434细胞参数表

细胞名称	COV434细胞（人卵巢颗粒肿瘤细胞）
别称	COV-434; COV 434
种属来源	人;卵巢
细胞类型	肿瘤细胞（卵巢颗粒瘤）
疾病类型	卵巢颗粒瘤（可能为高钙血症型卵巢小细胞癌）
生长特性	贴壁生长
细胞形态	上皮细胞样，多边形和纺锤形
保藏机构编号	ECACC; 07071909
培养基	DMEM + 10%胎牛血清 + 1%双抗
培养条件	37℃，5% CO2，95%空气，70-80%湿度
换液/传代	换液：2-3天；传代：4-6天；比例：1:2或1:3-1:5
消化时间	3-5分钟
倍增时间	每周2-3次
冻存液配方	基础培养基+8%DMSO+20%FBS 或 90%FBS + 10%DMSO
安全等级	BSL-1
用途限制	仅供科研使用
支原体检测	阴性
内毒素含量	≤3 EU/mL
细胞描述	从实体原发肿瘤建立的卵巢颗粒瘤细胞系
应用领域	17β-雌二醇影响研究；突变型p53研究；TLR表达研究

COV434人卵巢颗粒肿瘤细胞培养教程

COV434细胞的复苏

• 将COV434细胞在37℃水浴中快速解冻1-2分钟。

• 将细胞悬液转移到含预热培养基的离心管中。

• 以1000rpm离心5分钟，去除冻存液。

• 弃去上清液，用新鲜培养基重悬COV434细胞。

• 将细胞转移到培养瓶中，并放入培养箱中培养。

日常培养

• 换液频率: 每2-3天更换一次培养基。

• 观察: 观察COV434细胞的生长状态和形态（多边形和纺锤形）。

COV434细胞传代

• 传代周期: 4-6天；传代比例: 1:3 - 1:5

• 弃去旧培养基，用PBS洗涤COV434细胞1-2次。

• 加入适量0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液。

• 将培养瓶置于37℃培养箱中消化3-5分钟。

• 显微镜下观察COV434细胞变圆并开始脱落。

• 加入含血清的培养基终止消化。

• 轻轻吹打COV434细胞，制成单细胞悬液。

• 按照1:3 - 1:5的比例将细胞接种到新的培养瓶中。

COV434细胞冻存

• 冻存液配方: 基础培养基 + 8% DMSO + 20% FBS

• 细胞密度: 1-2 × 10^6 cells/mL

• 缓慢降温，将COV434细胞置于-80℃冰箱中过夜。

• 次日转入液氮中长期保存。

注意事项

• 支原体检测: 定期检测COV434细胞，确保结果为阴性。

• 内毒素控制: 内毒素含量应控制在≤3 EU/mL。

• 细胞生长控制: 避免COV434细胞过度生长，保持在对数生长期。

• 无菌操作: 在所有操作过程中保持无菌条件。

• 细胞形态观察: 定期观察COV434细胞形态，确保细胞生长状态良好。

细胞特性观察

• 小卵泡样聚集体: 关注COV434细胞是否形成小卵泡样聚集体。

• 细胞间缝隙连接: 观察与天然卵丘细胞共培养时是否形成细胞间缝隙连接。