NIH:OVCAR-3是一种重要的人卵巢癌细胞系，于1982年从一名60岁高加索女性患者的恶性腹水中建立。患者患有进展性卵巢腺癌，经环磷酰胺、顺铂和阿霉素（多柔比星）联合化疗后仍出现恶化。

OVCAR-3细胞呈上皮样特征，以鹅卵石状单层贴壁生长，局部可形成多层。
OVCAR-3细胞具有异常核型，染色体数目在亚三倍体至近三倍体范围内。多个正常染色体（11、13、14、15、16、17和22号）明显缺失，取而代之的是大量标记染色体和其他结构异常。细胞间还存在染色体的随机丢失和增加。

OVCAR-3人卵巢癌细胞特征

• 致瘤性：在裸鼠中致瘤（21天内100%形成肿瘤）

• 同工酶表达：AK-1,1; ES-D,1; G6PD,B; GLO-I,1; PGM1,1; PGM3,1

• 激素受体表达：雄激素受体阳性；雌激素受体阳性；孕酮受体阳性（可被17β-雌二醇诱导）

• 耐药性：对阿霉素（多柔比星）、美法仑和顺铂耐药

• 转染性能：适用于转染实验

• 研究应用：药物耐受性研究，激素治疗评估

• 应用领域：药物筛选，分子靶点识别，卵巢癌生物学研究

OVCAR-3人卵巢癌细胞参数表

细胞名称	NIH:OVCAR-3人卵巢癌细胞
细胞别称	NIH:OVCAR-3 (OVCAR-3, OVCAR3); Ovcar-3; NIH:Ovcar-3; NIH:OVCAR3;  NIH-OVCAR-3; NIHOVCAR3; OVCAR.3;OVCAR3; Ovcar3 ATCC编号: HTB-161
来源	人源卵巢; 高级别浆液性卵巢腺癌
建立背景	60岁高加索女性患者恶性腹水; 1982年建立
患者治疗史	环磷酰胺、顺铂和阿霉素(多柔比星)联合化疗
生长特性	贴壁生长，鹅卵石状单层，局部可多层; 多边形，上皮样
增殖指标	倍增时间约34-69小时; 饱和密度约1-1.5 x 10^5 cells/cm^2
致瘤性	软琼脂克隆形成阳性; 裸鼠中21天内100%形成肿瘤
培养基	RPMI-1640 + 20% FBS + 10 μg/mL 胰岛素 + 1% 青霉素/链霉素
培养环境	37°C, 5% CO2
传代方法	胰蛋白酶-EDTA消化; 推荐接种密度 2-4 x 10^4 cells/cm^2
染色体	异常，亚三倍体至近三倍体; 染色体数51-63
基因状态	微卫星稳定型 (MSS); P53突变型
受体表达	雄激素受体+; 雌激素受体+; 孕酮受体+; HER2/neu-
标志物	CA125+; CD44+; CD133+
同工酶	AK-1,1; ES-D,1; G6PD,B; GLO-I,1; PGM1,1; PGM3,1
敏感性	对阿霉素、美法仑和顺铂耐药; 对紫杉醇敏感
已完成分析	全基因组测序; DNA甲基化; 转录组; 蛋白质组; 代谢组
其他分析	GPI锚定蛋白; 糖基化谱; 外泌体蛋白质组
细胞功能	适用转染; 分泌IL-6, IL-8, VEGF等
安全检测	细菌、真菌、支原体均阴性; 内毒素≤3 EU/mL
保存条件	液氮长期保存; 复苏后存活率>85%; 干冰运输
用途	药物筛选; 分子靶点识别; 卵巢癌生物学研究

OVCAR-3人卵巢癌细胞培养教程

细胞传代

• 传代时机：当OVCAR-3细胞汇合度达到80-90%时进行传代。

• 传代比例：通常为1:3到1:6，适用于OVCAR-3细胞。

• 传代频率：大约每2-3天传代一次，OVCAR-3细胞的倍增时间约为18小时。

传代步骤

• 移除OVCAR-3细胞的旧培养基。

• 用PBS清洗细胞单层。

• 加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37°C孵育2-5分钟。

• 轻拍培养瓶，使细胞脱离。

• 加入含血清的新鲜培养基以终止消化。

• 将细胞悬液转移到离心管中，1000rpm离心5分钟。

• 弃上清，用新鲜培养基重悬细胞。

• 将细胞按所需比例接种到新的培养瓶中。

细胞冻存

• 冻存培养基：使用90% FBS + 10% DMSO来冻存OVCAR-3细胞。

• 降温步骤：缓慢降温（约1°C/分钟）至-80°C，然后转移到液氮中长期保存。

细胞复苏

• 快速解冻（37°C水浴，1-2分钟）复苏OVCAR-3细胞。

• 将细胞悬液缓慢加入预热的完全培养基中。

• 离心去除DMSO，重悬细胞并接种到培养瓶中。

OVCAR-3细胞适用于多种转染方法，包括：

• 脂质体转染法：如Lipofectamine等商业试剂。

• 钙磷酸盐共沉淀法。

• 电穿孔法。

• 病毒介导的转染：如慢病毒、腺病毒等。

• 聚合物介导的转染：如PEI (聚乙烯亚胺)。

• 核酸转染试剂：如FuGENE。

转染成功的标志

• 报告基因表达：如GFP荧光观察或荧光素酶活性测定。

• 目的蛋白表达：通过Western blot或免疫荧光检测。

• mRNA水平增加：通过RT-PCR或Northern blot检测。

• 细胞表型改变：如形态变化或生长特性改变。

• 功能性改变：如特定信号通路的激活或抑制。