OV-90细胞系源自一位64岁女性患者的卵巢（恶性乳头状浆液腺癌）。OV-90细胞系来源于一位没有卵巢癌家族史的法国白人患者，并于1992年建立。

OV90细胞系的核型为46,XX，具有特征性染色体异常，包括der(1)t(1;10)(p36;p15)、hsr(3)(p11)和der(9;17)(q10;q10)。

OV90细胞系特性特征

• 基因突变：p53基因突变：外显子6的Ser→Arg突变（密码子215）；3p24染色体区域存在缺失

• 蛋白表达：HER2/neu阳性、表达角蛋白

• ov90细胞呈现上皮样细胞、贴壁生长、在软琼脂中能形成集落

• 致瘤性：ov90细胞在裸鼠体内具有致瘤性

• 转移特征：ov90细胞表现出腹水转移的特征

• 与其他细胞系的比较：与TOV-21G细胞系相似，在3p24染色体上存在缺失、与TOV-112D细胞系不同，后者在3p24染色体上没有缺失

OV90细胞系参数表

细胞名称	OV90细胞系（人卵巢癌细胞）
细胞别称	OV90；OV-90；人卵巢癌细胞
来源信息	组织：卵巢，腹水转移灶；疾病类型：恶性乳头状浆液性腺癌
患者背景	64岁女性，III期，法裔加拿大血统，无卵巢癌家族史；建立时间：1992年8月
细胞特性	形态：上皮细胞样；生长方式：贴壁生长；倍增时间：~50小时
致瘤性和转移	在裸鼠体内具有致瘤性；表现出腹水转移特征
基因状态	HER2/neu：阳性；p53：突变（外显子6的Ser→Arg突变，密码子215）
蛋白表达	表达角蛋白
培养基	首选：42% MCDB 105 + 42% M199 + 15% FBS + 1% GA；替代：DMEM/F12 + 15% FBS
培养环境	温度：37°C；气相：5% CO2；液体高度：不超过3mm
传代与换液	传代比例：1:3，消化4分钟；换液频率：每周2-3次
培养容器	T25培养瓶：6-8ml培养基，1×10^6 cells；T75培养瓶：15ml培养基
冻存液配方	基础培养基 + 5% DMSO + 15-20% FBS
安全与使用	生物安全等级：1级；推荐代数：10代以内
特殊注意事项	细胞对氧气、密度和养分敏感，需定期换液；建议平躺培养以增大空气交换面积

OV90人卵巢癌细胞系培养教程

OV90细胞冻存与复苏

冻存

• 冻存液配方：基础培养基 + 5% DMSO + 15-20% FBS。

• 储存条件：液氮中长期保存。

复苏

• 在37°C水浴中快速解冻。

• 加入4 ml预热的培养基稀释OV90细胞悬液。

• 1000 rpm离心3分钟，弃去上清。

• 用1-2 ml新鲜培养基重悬OV90细胞。

• 将OV90细胞悬液转移到含适量培养基的培养瓶中，第二天换液并检查细胞状态。

传代步骤

• 弃去培养上清。

• 用不含钙、镁离子的PBS润洗OV90细胞1-2次。

• 加入适量胰酶消化4分钟。

• 加入等体积培养基终止消化。

• 1000 rpm离心5分钟，弃去上清。

• 用新鲜培养基重悬OV90细胞。

• 按1:3比例接种到新的培养瓶中。

注意事项

• 氧气、密度和养分敏感性：OV90细胞对氧气、密度和养分非常敏感，需要勤换液。

• 操作小心：避免过度吹打和离心，以免影响OV90细胞状态。

• 细胞代次：推荐使用10代以内的OV90细胞以保证实验结果的稳定性。

常见问题及OV90细胞健康检查

• 细胞污染：

• 支原体感染：可能改变细胞膜状态、细胞生长习性，导致实验结果不可靠。

• 细菌或真菌污染：迅速消耗培养基养分，导致OV90细胞死亡。

  
  

  细胞状态不佳：

• 形态异常：OV90细胞变圆或脱落，可能由于培养条件不适或污染。

• 生长缓慢：可能由于培养基老化、传代过度或OV90细胞密度过低。

  
  

  传代问题：

• 消化不完全或过度消化：影响OV90细胞贴壁和生长。

• 传代比例不当：影响OV90细胞生长状态。

  
  

  培养基问题：

• 培养基老化：叶酸不稳定，建议现配培养基，两周内用完。

• 换液不及时：需定期换液以保证OV90细胞健康

  
  

  OV90细胞健康检查：

• 显微镜观察：观察OV90细胞形态和密度，健康细胞应贴壁生长，形态均一。

• 活力染色：使用台盼蓝染色，检查OV90细胞活力。

• 支原体检测：定期检测支原体感染。

• 增殖速率：监测OV90细胞倍增时间，健康的细胞倍增时间约为50小时。

• 培养基颜色和浑浊度：变黄或浑浊可能指示代谢旺盛或污染。健康培养基应保持澄清。