HEY-T30人卵巢癌细胞

HEY-T30细胞是一种具有紫杉醇抗性的人类卵巢癌细胞系，源自于亲代细胞系HEY。通过将HEY细胞在培养基中逐步暴露于增加的紫杉醇浓度中养护六个月形成，并持续在含有30nmol/L紫杉醇的培养基中维持。

HEY-T30细胞系于2006年由Jurriaan Brouwer-Visser研究所分离，成为研究紫杉醇抗性和其他治疗耐药性机制的重要工具。

细胞名称	HEY-T30细胞（别称：HEYT30细胞）
来源	人类卵巢癌症异种移植物，亲代细胞系为HEY
分离时间	2006年
研究所	Jurriaan Brouwer-Visser研究所
细胞形态	上皮样
生长方式	贴壁生长
疾病	乳头状囊腺癌
紫杉醇抗性	是，通过将HEY细胞逐步暴露于逐渐增加的紫杉醇浓度中历时6个月形成，维持在含30nmol/L紫杉醇的培养基中
抗药性	对顺铂（一种烷基化剂）表现出一定程度的抗性
培养基	高糖DMEM+10%FBS+1%P/S
培养条件	37℃，5% CO2
应用领域	癌症研究，微管稳定剂和化疗耐药性机制研究
异种移植物能力	在半固态培养和免疫缺失的CBA/CJ小鼠体内存在差异
产品形式	冷冻
支原体检测	阴性
储存条件	液氮的气相
预期用途	仅供实验室研究使用，不适用于任何动物或人类治疗、人类或动物消费、或诊断用途
其他说明	该细胞系可用于研究对微管稳定剂的耐药性和其他化疗耐药性机制

解冻 HEY-T30 细胞小瓶并尽快开始培养，以确保获得最高的活力。如果收到细胞后需要继续储存冷冻培养物，则应将其储存于液氮蒸汽相中，而不是 -70°C。在 -70°C 储存会导致 HEY-T30 细胞活力丧失。
在接种 HEY-T30 细胞时将紫杉醇添加到含 FBS 的 RPMI-1640 培养基中。
将 HEY-T30 小瓶通过在 37°C 水浴中轻轻摇动解冻。为降低污染可能性，请将 O 型圈和盖子放在水外。解冻应迅速进行（大约 2 分钟）。
从水浴中取出 HEY-T30 小瓶（当内容物解冻后立即取出），并通过浸入或喷洒 70% 乙醇进行消毒。从这一点开始的所有操作都应在严格无菌条件下进行。
将 HEY-T30 小瓶内容物转移到含有 9.0 mL 完全培养基的离心管中，并以约 125 x g 的速度旋转 5-7 分钟。
用推荐的完全培养基 (有关 HEY-T30 培养物推荐稀释比例，请参见特定批次信息) 重新悬浮细胞沉淀，并分配到 25 cm2 或 75 cm2 培养瓶中。在细胞恢复过程中避免培养基过度碱化很重要。建议在加入 HEY-T30 小瓶内容物之前，将含有完全培养基的培养容器放入培养箱中至少 15 分钟，使培养基达到正常 pH 值 (7.0 至 7.6)。
将 HEY-T30 培养物置于 37°C 的合适培养箱中培养。如果使用本产品描述的培养基，则建议使用 5% CO2 in air 的气氛。

取出并丢弃 HEY-T30 培养基。用 1.0 至 2.0 mL 无 Ca++/Mg++ 的 Dulbecco's 磷酸盐缓冲液 (D-PBS) 或 0.25% (w/v) 胰蛋白酶 - 0.53 mM EDTA 溶液短暂冲洗细胞层，去除所有含有胰蛋白酶抑制剂的血清痕迹。
向培养瓶中加入 1.0 至 2.0 mL 胰蛋白酶-EDTA 溶液，并在倒置显微镜下观察 HEY-T30 细胞，直至细胞层分散（通常在 5 至 15 分钟内）。注意：为避免 HEY-T30 细胞团聚，请勿在等待细胞脱落时敲击或摇晃培养瓶。难以脱落的 HEY-T30 细胞可以置于 37°C 下以促进分散。
加入 6.0 至 8.0 mL 完全培养基，并通过轻轻 pipet 吸取 HEY-T30 细胞悬液。
将 HEY-T30 细胞悬液转移到离心管中，并以约 125 x g 的速度旋转 5-10 分钟。丢弃上清液。
用 10mL 新鲜培养基重新悬浮 HEY-T30 细胞沉淀。
向新的培养容器中加入适量的 HEY-T30 细胞悬液。
将 HEY-T30 培养物置于 37°C 培养箱中培养。
传代比例：建议使用 1:3 到 1:12 的传代比例。