RWPE-1细胞系是一种人类前列腺上皮细胞系，最初从一名54岁白人男性的正常前列腺周边组织分离。RWPE1细胞经过人乳头瘤病毒18型（HPV-18）转染，获得了持续培养的能力。RWPE1细胞系保留了许多正常前列腺上皮细胞的特征。
RWPE1细胞在32代时，大多数细胞的染色体数目在二倍体范围内（45-51），主要有两个染色体群体：45，X，-Y和51，XY。RWPE1细胞不致瘤。

RWPE1细胞特征特性

• RWPE1细胞表达激肽释放酶3（KLK3），即前列腺特异性抗原（PSA）。表达雄激素受体，暴露于雄激素后可激活。

• RWPE1细胞表达细胞角蛋白8和细胞角蛋白18。

• p53和pRB基因阳性。

• 三维培养特性：在三维基质胶（Matrigel）培养中，RWPE1细胞在暴露于雄激素时能组织成腺泡（acini）并将PSA分泌到管腔中。

• 体内特性：当与Matrigel或基质细胞混合注射到雄性无胸腺啮齿动物体内时，RWPE1细胞也会组织成腺泡并产生PSA。

细胞系衍生及致瘤性研究

• RWPE-1细胞可通过Kirstin鼠肉瘤病毒（Ki-MuSV）转化为致瘤细胞系RWPE-2和RWPE2-W99。

• 通过暴露于N-甲基-N-亚硝基脲（MNU），可从RWPE-1细胞系衍生出一系列模拟前列腺癌症进展的致瘤细胞系，包括WPE1-NA22、WPE1-NB14、WPE1-NB11和WPE1-NB26。

病毒筛查

• 对乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒和人类免疫缺陷病毒均为阴性。

• PCR检测证实存在HPV病毒DNA序列。

RWPE1细胞参数表

细胞名称	RWPE1细胞（人正常前列腺上皮细胞）
细胞别称	RWPE-1；pwpe1; pwpe-1; 人正常前列腺上皮细胞
患者信息	人；男/54岁；前列腺周边组织
形态学	上皮细胞样，贴壁生长
致瘤性	不致瘤
生物安全等级	2级
保藏信息	ATCC; CRL-11609
培养基	K-SFM+0.05 mg/ml BPE +5 ng/ml EGF+ 1% P/S
培养环境	37℃；空气95%，二氧化碳5%
分子表达	KLK3（PSA）；细胞角蛋白8/18；p53+；pRB+；雄激素受体（暴露于雄激素后表达）
三维培养特性	在三维基质胶培养中，暴露于雄激素时形成腺泡，分泌PSA
体内特性	与Matrigel或基质细胞混合注射到雄性无胸腺啮齿动物体内时，组织成腺泡并产生PSA
衍生细胞系	RWPE-2，RWPE2-W99，WPE1-NA22，WPE1-NB14，WPE1-NB11，WPE1-NB26
细胞检测	乙肝、丙肝、HIV阴性；PCR证实HPV DNA序列阳性
使用限制	仅供科研使用

RWPE1人正常前列腺上皮细胞培养教程

RWPE-1细胞传代步骤

观察RWPE-1细胞生长状态

• 若细胞密度低于60%，可更换新鲜培养基继续培养。

• 若细胞密度达到80-90%，进行传代。

传代操作

• 移除培养瓶中的旧培养基。

• 用PBS轻轻清洗细胞1-2次。

• 加入适量胰酶-EDTA消化液，37℃消化3-5分钟。

• 轻轻拍打培养瓶，观察细胞是否脱落。

• 加入等量完全培养基终止消化。

• 收集RWPE-1细胞悬液，1000 rpm离心5分钟。

• 弃上清，用新鲜完全培养基重悬细胞。

• 按1:3-1:5的比例将细胞接种到新的培养瓶中。

• 加入适量新鲜完全培养基，放入37℃、5% CO2培养箱中培养。

RWPE-1细胞培养注意事项

• 定期观察RWPE-1细胞形态和生长状态。

• 每2-3天更换一次培养基。

• 保持培养环境的无菌状态。

• 避免RWPE-1细胞过度生长或密度过高。

RWPE-1细胞复苏步骤

• 快速解冻RWPE-1细胞。

• 将RWPE-1细胞悬液转移到含有预热完全培养基的培养瓶中。

• 24小时后更换新鲜培养基，去除DMSO。

RWPE-1细胞在Matrigel培养中的表现

• 在三维Matrigel培养中，RWPE-1细胞表现出以下特征：

• 腺泡形成：在雄激素刺激下，RWPE-1细胞能够形成腺泡（acini）结构。

• PSA分泌：这些腺泡能够向培养基中分泌前列腺特异性抗原（PSA）。

• 体内表现：将RWPE-1细胞与Matrigel或基质细胞混合后注射到雄性裸鼠体内，也能形成腺泡并产生PSA。