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您的当前位置:首页 > 产品信息 > 人源细胞系 > NCI-H660细胞系(人神经内分泌前列腺癌细胞)
产品名称:NCI-H660细胞系(人神经内分泌前列腺癌细胞)
产品详细说明
  • 来源:前列腺
  • 细胞特征:聚团悬浮,疏松贴壁,上皮样
  • 培养基:RPMI 1640+10%FBS+10nM Hydrocortisone+10nM β-estradiol+2nM L-Glutamine+0.5%ITS-G+1%P/S
  • 其他:NCI-H660细胞表达左旋多巴羧化酶和具有蛙皮素样免疫反应性

NCI-H660细胞是从一名63岁高加索地区(白人)男性前列腺癌患者的淋巴结转移灶中分离,是一种人神经内分泌前列腺癌细胞系。

NCI-H660细胞呈上皮细胞样形态,悬浮方式生长,但也有少量细胞会贴附生长。NCI-H660细胞通常使用10代以内的细胞进行实验。

NCI-H660细胞系特性特征

  • NCI-H660细胞外观类似小细胞癌

  • NCI-H660细胞表达升高的左旋多巴羧化酶和蛙皮素样免疫反应性

  • NCI-H660细胞表达功能性心钠素(ANP)受体,但添加ANP不影响细胞生长模式

NCI-H660细胞系参数表

细胞名称 NCI-H660细胞系(人神经内分泌前列腺癌细胞)
细胞别称 NCI-H660;NCIH660;H660;人神经内分泌前列腺癌细胞
种属组织来源 人(Homo sapiens);前列腺癌淋巴结转移
细胞类型 神经内分泌前列腺癌小细胞
患者信息 63岁高加索地区(白人)男性
ATCC编号 CRL-5813
形态特征 上皮细胞样;主要悬浮生长,少量贴附
基础培养基/血清 RPMI-1640;5% FBS
添加剂 0.005 mg/ml 胰岛素、转铁蛋白、30nM 亚硒酸钠、10 nM 氢化可的松、10 nM beta-雌二醇、2mM L-谷氨酰胺、1%双抗
培养环境 37℃;95%空气 + 5%二氧化碳
传代条件 密度80%-90%;首次传代比例1:2;推荐使用10代以内
冻存条件 无血清冻存液;液氮储存
受体表达 表达功能性心钠素(ANP)受体;雄激素受体(AR)可能低表达或缺失(待验证)
癌症标志物 表达升高的左旋多巴羧化酶和蛙皮素样免疫反应性;可能表达嗜铬粒蛋白A (CgA)和突触素 (SYN)(待验证)
其他标志物 前列腺特异性抗原(PSA)表达未知;可能表达ASCL1或NEUROD1(待验证)
基因改变/扩增 可能存在TP53、RB1、PTEN突变或缺失;MYCN、AURKA可能扩增(待验证)
质量控制 应进行支原体检测和STR鉴定
运输方式 复苏发货(T25瓶)或冻存发货(需干冰)
供应限制 仅限科学研究,不可用于治疗
生物安全等级 未明确说明(通常为BSL-2)
主要研究方向 前列腺癌(特别是神经内分泌型)、小细胞癌、癌症生物学、药物筛选和开发、转移机制研究
细胞特性 培养代次建议20代以内,贴壁效率>90%
肿瘤相关特性 迁移能力低,侵袭能力中等,在免疫缺陷小鼠中可形成肿瘤
转染和药物反应 转染效率中等(40-60%),对米托坦(Mitotane)敏感
细胞周期分布 G0/G1: 60-70%, S: 15-20%, G2/M: 10-15%
其他特征 基础凋亡率<5%,高糖酵解率

培养教程

NCI-H660人神经内分泌前列腺癌细胞系培养教程

NCI-H660细胞复苏

  • a. 将含1 mL NCI-H660细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻。 

  • b. 加入4 mL预热的培养基混合均匀。 

  • c. 1000 rpm离心3分钟,弃去上清液。 

  • d. 加入1-2 mL培养基重悬细胞。 

  • e. 将NCI-H660细胞悬液转移到含适量培养基的培养瓶或10 cm培养皿中(约8 mL培养基)。 f. 培养过夜,第二天换液并检查细胞密度。

NCI-H660细胞传代:

  • a. 当NCI-H660细胞密度达到80%-90%时进行传代。

  • b. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 

  • c. 加入适量胰酶消化液,37℃消化2-3分钟。 

  • d. 显微镜下观察细胞变圆并开始脱落。 

  • e. 加入含血清的培养基终止消化。 

  • f. 吹打NCI-H660细胞,制成单细胞悬液。 

  • g. 按1:2的比例进行传代(例如,1个T25瓶传2个T25瓶或2个6cm皿)。

注意事项与NCI-H660细胞质量控制:

  • 使用产品时应注意无菌操作,避免污染。

  • 本产品含有血清和双抗,如无特别需要不用额外添加。

  • 首次传代建议1:2传代。

  • NCI-H660细胞主要呈悬浮生长,少量细胞会贴附。

  • 培养过程中要定期观察NCI-H660细胞状态,确保细胞健康。

  • 推荐使用10代以内的NCI-H660细胞。

  • 定期进行支原体检测和STR鉴定,以确保NCI-H660细胞系的真实性和纯度。

NCI-H660细胞冻存:

  • 使用无血清冻存液。

  • 将NCI-H660细胞悬液分装到冻存管中。

  • 缓慢降温后转入液氮中长期保存。

STR鉴定及相关

Amelogenin X
CSF1PO 12
D2S1338 18,24
D3S1358 14,18
D5S818 11
D7S820 8,10
D8S1179 9,10
D13S317 8
D16S539 11
D18S51 15,16
D19S433 15
D21S11 28,31
FGA 23,24
Penta D 9,12
Penta E 12
TH01 7,9.3
TPOX 8
vWA 17
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