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产品名称:lncap细胞(人前列腺癌细胞LNCaP clone FGC)
产品详细说明
  • 来源:前列腺;左锁骨淋巴结癌转移灶
  • 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
  • 培养基:生长培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
  • 其他:可诱导EMT,存在具有更强迁移能力的S/P细胞亚群

LNCaP clone FGC是一种源自人前列腺癌的上皮样细胞系,于1977年从一名50岁白人男性(血型B+;确诊为转移性前列腺癌)的左锁骨上淋巴结的针吸活检中分离。LNCaP clone FGC细胞广泛应用于癌症研究。

lncap细胞系属于异四倍体细胞系,具有复杂的染色体组成。其模态染色体数为84,在22%的细胞中出现。染色体数目为86(20%)和87(18%)的细胞也较为常见,高倍性细胞的比例为6.0%。LNCaP clone FGC细胞在裸鼠体内表现出致瘤性。

lncap细胞独特的生物学特性:

  • 基因表达:雄激素受体(AR)和前列腺特异性抗原(PSA)。

  • 雄激素敏感性:对5α-二氢睾酮(DHT)有响应。

  • 酸性磷酸酶:表达人前列腺酸性磷酸酶。

  • 致瘤性:在体外和体内(裸鼠)均具有致瘤性。

  • 遗传特征:染色体数目:46-91,众数为76-91、染色体异常:多种染色体异常,包括缺失和易位。

  • LNCaP clone FGC细胞是致瘤的,这些细胞在裸鼠体内具有致瘤性

  • LNCaP细胞可能具有EMT特性,这与癌症转移和侵袭能力相关

lncap细胞参数表

细胞名称 lncap细胞(人前列腺癌细胞LNCaP clone FGC)
别称 LNCaP-Clone-FGC; LNCaP.FGC; LNCaP-FGC; LNCaP FGC; LNCaP-ATCC
来源信息 50岁白人男性,B+血型,左锁骨淋巴结转移性前列腺癌
建立信息 1977年由J.S. Horoszewicz等人建立
基本特征 人源上皮样肿瘤细胞,BSL-1级别
生长特性 贴壁生长,形成集落,轻微吸附,不形成完全汇合
生长参数 倍增时间约32-36小时,快速酸化培养基
遗传特征 染色体数46-91,众数76-91
培养基和添加物 RPMI 1640 + 10% FBS + 2 mM L-谷氨酰胺 + 抗生素(可选)
培养环境 37°C, 5% CO2
培养容器 Corning cellbind细胞培养瓶或多聚-L-赖氨酸包被的培养皿
传代和换液 比例1:3至1:4,每周换液2-3次,传代后48小时内不扰动
受体表达 雄激素受体(AR)+, 雌激素受体(ER)+
特异性标记 前列腺特异性抗原(PSA)+, 人前列腺酸性磷酸酶+, 前列腺特异性膜抗原(PSMA)+
基因状态 p53野生型, PTEN缺失
激素反应 对5α-二氢睾酮(DHT)敏感,初始雄激素依赖可发展为非依赖
肿瘤特性 中等转移潜能,相对较低侵袭能力,软琼脂和裸鼠中具致瘤性
特殊性质 可诱导EMT,存在具有更强迁移能力的S/P细胞亚群
冻存方法 55%基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO,液氮气相保存
复苏后存活率 约70-80%
污染检测 细菌、真菌、支原体均为阴性
鉴定 人源确认,STR分型应与ATCC参考谱一致
主要用途 前列腺癌研究,药物筛选,雄激素信号通路研究,EMT研究
细胞库编号 ATCC: CRL-1740; ECACC: 89110211; BCRJ: 0149; BCRC: 60088

培养教程

LNCaP clone FGC人前列腺癌细胞培养教程

细胞接种和传代

  • 接收细胞处理:

  • 使用75%酒精消毒培养瓶表面。

  • 放入37°C培养箱静置2-4小时。

  • 接种密度:

  • T25瓶中加入10-12ml完全培养基,10cm皿中加12-15ml。

  • 传代比例:

  • 首次传代建议1:2,之后推荐1:3-1:4。

  • 细胞密度达到70-80%时进行传代,避免过度生长。

  • 传代步骤:a. 弃旧培养基,PBS洗涤1-2次。 b. 加入预热的胰酶,37°C消化。 c. 每30秒轻柔吹打检查细胞是否脱落,避免过度消化。 d. 细胞脱落后,加入等体积培养基终止消化。 e. 1000rpm离心5分钟,弃上清。 f. 加入新鲜培养基重悬细胞,按传代比例接种。

  • 细胞冻存:

  • 冻存液配方: 55%基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO。

  • 冻存步骤:a. 常规消化收集细胞。 b. 加入预冷的冻存液重悬细胞。 c. 转移至冻存管,放入-80°C冰箱过夜,次日转入液氮长期保存。

常见问题与注意事项

  • 细胞聚集问题:

  • 在传代时使用滴管反复轻柔吹打来分散细胞集落。

  • 使用CellBIND细胞培养瓶或多聚-L-赖氨酸溶液包被过的培养皿,有助于减少细胞聚集。

  • 培养基pH控制:

  • 每周换液2-3次,密切观察培养基颜色变化。

  • 细胞密度达到70%以上时,培养基消耗较快,需更频繁地观察并换液。

  • 细胞生长特性:

  • LNCaP细胞生长缓慢,形成集落而非单层,传代时应注意避免过度生长。

  • 避免剧烈震荡和低温刺激,以维持细胞的健康状态。

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