来源：肺粘膜上皮细胞癌；肺
细胞特征：贴壁细胞 , 上皮细胞样
培养基：生长培养基：RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
其他：表现出鳞状分化的多种标记：细胞角蛋白、波形蛋白、黏液洋红染色呈阳
NCI-H292细胞系源自肺粘液表皮样癌（也称为肺粘液上皮样癌）的淋巴结转移，最初从一名32岁的黑人女性患者的淋巴结转移部位分离。
NCI-H292细胞具有上皮细胞样的形态，呈贴壁生长，并在亚显微结构上保留了粘膜上皮细胞的特征。NCI-H292细胞对乙型肝炎病毒（HBV）具有易感性，能够支持HBV的生长。
NCI-H292细胞是一个染色体计数接近二倍体的人类细胞系。模式染色体数目为47，出现在36%的细胞中。倍体计数较高的细胞率为3.9%。大多数细胞共有12个标记。其中包括del（1）（q32.1）、der（5）t（5；13）（p15.33；q11）、i（5p）、der⑴t（1；？）（p34.3；？）和der（6）t（6；7）（p25.3；q21.2）。所有标记物均以单拷贝形式存在于每个细胞中。正常的N1和N6缺失。有两条正常的X染色体。未发现其他异常。
NCI-H292细胞系具有以下分子、表达和基因特征：
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分子特征：保留了粘膜上皮细胞的特性，在亚显微结构上表现出这一特点；表现出多种鳞状上皮分化标记；
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表达特征：角蛋白（Keratin）表达阳性、波形蛋白（Vimentin）表达阳性、黏液洋红（Mucicarmine）染色呈阳性、神经丝三联蛋白（Neurofilament triplet protein）表达阴性；
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与HLA特异性的人同种异体抗血清的反应性：（A1；A3；A10；A19；B12；B17；B22；和B40交叉反应基团）
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基因特征：左旋多巴脱羧酶（L-DOPA decarboxylase）表达阴性；对乙型肝炎病毒（HBV）具有高度感染性，可用于研究HBV相关基因在病毒性肝炎和肝癌发生中的作用；
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NCI-H292细胞能够在裸小鼠体内形成肿瘤
NCI-H292细胞系参数表
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细胞名称
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NCI-H292细胞系【人肺癌细胞(淋巴结转移)】
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细胞别称
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NCI-H292; H292; h292; H-292; NCI-HUT-292; Hut292; NCIH292
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患者信息
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人 (Homo sapiens) ；32岁；女性； 黑人
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组织来源
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肺；肺支气管黏液上皮样癌的淋巴结转移
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细胞类型
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上皮细胞
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疾病
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肺粘液表皮样癌
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细胞形态
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上皮细胞样； 贴壁生长
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细胞大小 核形
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约15-20μm (估计值) ； 圆形或卵圆形
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细胞极性
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存在 (上皮细胞特征)
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基础培养基
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RPMI-1640+10% 胎牛血清 (FBS)+1% 双抗（青霉素/链霉素）
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培养环境
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CO2浓度 5%，湿度 70-80%，培养温度 37°C
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传代比例
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1:2 至 1:4 (推荐)
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细胞密度
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2-5 x 10^4 cells/cm² (推荐)
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换液频率
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每2-3天 (推荐)
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胰酶消化时间
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3-5分钟 (0.25% 胰蛋白酶-EDTA)
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细胞活力
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≥95%
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阳性标记
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角蛋白、波形蛋白、黏液洋红染色
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阴性标记
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神经丝三联蛋白、L-DOPA脱羧酶
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HLA表达
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具有特异性 (具体未详)
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EGF受体
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表达 (典型上皮细胞特征)
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HBV易感性
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支持HBV生长
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成瘤性
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在裸鼠中可形成肿瘤
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转移潜能
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来源于转移灶，具有转移潜能
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主要用途
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肺癌研究、HBV研究、药物筛选、转移研究
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特殊应用
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粘液分泌研究、上皮-间质转化研究
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冻存温度
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-196°C (液氮) 或 -80°C
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复苏温度
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37°C水浴，快速解冻
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细胞冻存液
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90% 培养基 + 10% DMSO
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冻存存活率
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≥85% (推荐)
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无菌检测
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阴性
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支原体检测
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阴性
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细胞代数
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建议使用低代数细胞（<20代）
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ATCC编号
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CRL-1848™
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生物安全等级
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BSL-2
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粘液分泌
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具有粘液分泌能力
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培养教程
NCI-H292人肺癌细胞系培养教程
NCI-H292细胞复苏操作
NCI-H292细胞换液
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频率： 每2-3天换液一次。
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方法： 吸出旧培养基，加入预热的新鲜完全培养基。
NCI-H292细胞传代
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时机： 当NCI-H292细胞密度达到80-90%时进行传代。
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比例： 1:2 至 1:4。
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步骤：
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a. 吸出培养基，用PBS洗涤NCI-H292细胞1-2次。
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b. 加入适量0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37°C消化3-5分钟。
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c. 显微镜下观察NCI-H292细胞变圆并开始脱落。
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d. 加入含血清的完全培养基终止消化。
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e. 以1000rpm离心5分钟，弃去上清液。
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f. 用新鲜完全培养基重悬NCI-H292细胞。
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g. 按所需比例将NCI-H292细胞接种到新的培养瓶中。
注意事项
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操作过程中保持NCI-H292细胞无菌条件。
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使用前将培养基、PBS等预热至37°C。
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避免NCI-H292细胞过度消化。
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定期检查NCI-H292细胞培养是否有污染。
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建议使用低代数NCI-H292细胞（<20代）。
NCI-H292细胞冻存
NCI-H292细胞安全注意事项
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生物安全等级： BSL-2，需要在生物安全柜中操作。
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个人防护： 操作时需穿戴实验服、手套等个人防护装备。
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废弃物处理： NCI-H292细胞培养废液和接触过NCI-H292细胞的耗材需要进行灭菌处理后再丢弃。
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避免接触： 操作过程中避免直接接触NCI-H292细胞或培养液，防止意外感染。
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无菌操作： 严格遵守无菌操作规程，避免污染。
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细胞来源： 注意NCI-H292细胞来源于人体肿瘤组织，可能携带未知病原体。
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细胞鉴定： 定期进行STR鉴定，确保NCI-H292细胞系纯度。
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记录保存： 详细记录NCI-H292细胞培养过程和处理方法。
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仅用于研究： NCI-H292细胞仅限于科学实验研究使用，不得用于其他目的。
STR鉴定及相关
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Amelogenin
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X
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CSF1PO
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10
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D2S1338
|
21,24
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D3S1358
|
16
|
|
D5S818
|
13
|
|
D7S820
|
10
|
|
D8S1179
|
11,14
|
|
D13S317
|
11,12
|
|
D16S539
|
9,13
|
|
D18S51
|
16
|
|
D19S433
|
12,13.2
|
|
D21S11
|
28
|
|
FGA
|
22,26
|
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Penta D
|
9
|
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Penta E
|
13,15
|
|
TH01
|
8
|
|
TPOX
|
8,11
|
|
vWA
|
16 (CCRID)
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16,17 (ATCC=CRL-1848; Cosmic-CLP=753604; PubMed=25877200)
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