HKb20人肾上皮细胞系由日本科学家杉本健司于2002年从正常人类肾脏上皮组织中提取并转化而成。hkb20细胞经过转化处理，具备了稳定的生长特性，适合在实验室中进行长期培养。
HKb20细胞呈现典型的上皮细胞形态，具有贴壁生长的特征，能够较好地模拟肾小管上皮细胞的生理功能。hkb20细胞系广泛应用于生物医学研究，特别是在药物筛选和肾脏疾病模型的构建中，因其可以有效反映肾脏上皮细胞的生理状态，成为研究肾脏疾病的理想工具。

HKb20细胞参数表

HKb20人肾上皮细胞培养教程

细胞复苏步骤

• 从液氮中取出HKb20细胞冻存管后，立即放入37℃水浴中解冻，解冻过程应在1至2分钟内完成。解冻后，将HKb20细胞悬液转移至含有5mL新鲜培养基的离心管中，轻轻混匀。

• 以1000 RPM的速度离心5分钟，弃去上清液。然后加入1-2mL新鲜培养基，轻轻吹打均匀，之后将HKb20细胞悬液接种于6cm培养皿或T25培养瓶中，并加入约6mL培养基，放入培养箱中过夜培养。

细胞传代步骤

• 当HKb20细胞覆盖培养瓶80%-90%时，进行传代操作。通常HKb20细胞的传代比例为1:3至1:4，初次传代时建议按1:2的比例进行。

• 先弃去旧培养基，用无钙镁的PBS轻轻冲洗HKb20细胞1-2次，然后加入0.25%胰蛋白酶（含EDTA）消化细胞，消化时间约为2-3分钟。当大部分细胞变圆并脱落时，迅速加入完全培养基终止消化。

• 胰酶消化后的HKb20细胞悬液以1000 RPM离心5分钟，弃去上清液，补加新鲜培养基后按比例接种到新的培养瓶中。

细胞冻存步骤

• HKb20细胞在生长状态良好时可以进行冻存操作。通常在细胞达到适合的密度或传代状态时，收集用于冻存。

• 用少量胰酶消化HKb20细胞，轻轻吹打使其脱落。随后，将细胞悬液离心（1000 RPM，5分钟），弃去上清液后用冻存液（90% FBS + 10% DMSO）重悬HKb20细胞。按照5x10^6至1x10^7 cells/mL的密度，将细胞分装入冻存管中，逐步降温至液氮温度进行长期保存。