SK-NEP-1细胞系源自一位25岁白人女性的肾组织，取自肾母细胞瘤和胸膜渗出液。sknep1细胞系常用于研究尤文氏肉瘤，能在裸小鼠体内能够形成类似肾母细胞瘤的小细胞肿瘤。
形态与结构：SK-NEP-1细胞呈上皮样，圆形，具有少量微绒毛、连接复合体，以及发育良好的高尔基体和光滑内质网。细胞还含有脂滴，但无病毒颗粒。

SK-NEP-1细胞特性特征

• 染色体特征：（P12）低倍体至高倍体（+A1、+A2、+C、+D、+E、+F、+G），异常包括肢端部碎片、继发性收缩和大的亚着丝粒标记

• 抗原表达：血型：A型；Rh因子：阳性（Rh+）

• 同工酶表达：AK-1，1；ES-D，1；G6PD，B；GLO-I，2；Me-2，2；PGM1，1-2；PGM3，1

• 致瘤性：在裸小鼠身上形成与肾母细胞瘤一致的小细胞肿瘤

• 转移性：可在胸腔积液中发现转移性肿瘤细胞

SK-NEP-1细胞参数表

SK-NEP-1人肾母细胞瘤细胞培养教程

传代步骤

• 观察SKNEP1细胞达到合适密度后，弃去培养基。

• 使用PBS轻轻冲洗SKNEP1细胞以去除残留血清。

• 加入适量的胰蛋白酶-EDTA溶液，在37°C孵育2-3分钟。

• 轻轻拍打培养瓶，帮助SKNEP1细胞脱落。

• 加入含血清的培养基终止胰蛋白酶消化作用。

• 以1:2或1:3的比例将SKNEP1细胞悬液转移至新的培养瓶中。

冻存和复苏

冻存步骤

• 收集SKNEP1细胞并离心。

• 使用90%培养基和10% DMSO的冻存液，缓慢降温至-80°C。

• 随后转移至液氮中长期保存。

复苏步骤

• 从液氮中取出SKNEP1细胞并快速解冻。

• 缓慢加入预热的培养基，以减缓温度骤变对SKNEP1细胞的冲击。

• 离心去除DMSO，重悬SKNEP1细胞并接种于新的培养瓶中。

常见问题及解决方案

• 细胞生长缓慢或停滞：检查SKNEP1细胞培养基成分是否充足，温度和CO2浓度是否稳定。

• 细胞形态异常：检查SKNEP1细胞是否有污染，或细胞传代是否过度。

• 培养基污染：遵循严格的无菌操作，定期更换SKNEP1细胞培养基。

• 细胞贴壁不良：可能需要优化SKNEP1细胞培养基或重置培养条件。

• 传代后存活率低：可能需要调整胰酶消化时间和复苏速度。